背景与目的:细胞生长依赖于正常的脂质代谢,如,在肿瘤细胞的快速增殖和迁移过程中,脂质分子可以控制双层质膜的生物合成,也可以作为信号分子调节肿瘤的发生和发展;此外,脂质代谢也加强肿瘤细胞对氧化应激等凋亡诱导因素的抵抗能力。细胞脂质代谢有赖于正常的脂肪酸合成酶的表达以及活性,脂肪酸合成酶表达的转录调控是该领域研究的重要方向。目前研究表明,许多核受体在脂质代谢的调节中起到了关键性作用,如:法尼醇X受体(FXR)在胆汁酸代谢中起重要作用;过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)对于成纤维细胞前体转化为脂肪细胞至关重要;肝细胞核因子4(HIF4)对于维持脂质稳态起到了重要作用。NR6A1是核受体亚家族6,A组,成员1,是配体激活的转录因子核受体超家族的成员之一。研究发现,与NR6A1相近的许多核受体家族成员与脂肪代谢密切相关。其中,NR2A1对维持肝脏基因表达和脂质稳态起着重要的作用;NR4A1是葡萄糖和脂质稳态,以及脂肪形成的关键转录调控因子;NR4A2、NR4A3在动脉粥样硬化病变巨噬细胞中的过表达,可以减少脂质负荷和炎症反应。NR5A1在类固醇生成,以及NR5A2在胆固醇逆转运、胆汁酸稳态和类固醇生成中起主要作用。NR6A1是否调节肝脏细胞的脂质代谢尚不清楚,本研究拟探讨:(1)NR6A1是否可以调节肝脏脂代谢;(2)NR6A1是否调节肝脏脂代谢相关信号以及脂代谢酶的表达,并明确具体机制。方法:采用siRNA介导的基因沉默及载体介导的基因过表达技术,调节细胞中靶基因表达水平;采用油红O染色技术观察细胞内中性脂质含量;通过RT-q PCR方法验证NR6A1以及脂质代谢基因的表达;采用蛋白质免疫印迹技术观察靶蛋白含量,以及信号分子的激活。结果:(1)NR6A1基因敲低可以增加HepG2中脂质聚集以及胰岛素诱导的HepG2细胞的增殖和迁移。(2)NR6A1基因敲低的HepG2细胞中,如下基因表达增加:脂肪生成基因包括脂肪酸合成酶,甘油二酯酰基转移酶-2,苹果酸酶1,微粒体甘油三酯转运蛋白和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶;以及脂肪酸氧化限速酶肉碱棕榈酰转移酶1A。(3)NR6A1通过哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1),而非哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2(mTORC2)调节细胞中脂质含量。(4)NR6A1的脂质代谢调节作用有赖于正常的胰岛素受体下游信号。(5)NR6A1基因沉默通过miR-205-5p增加HepG2细胞中胰岛素受体的表达。(6)miR-205-5p部分介导了NR6A1的脂质代谢调节作用。结论:NR6A1是一个新的调节HepG2细胞脂质代谢的核受体,它可以通过调节胰岛素受体下游信号,进而影响脂质合成相关基因的表达而发挥脂质代谢调节作用。