半胱氨酸蛋白酶抑制剂(cystatins)是一类广泛分布的半胱氨酸蛋白酶抑制因子,在哺乳动物的正常生理状态和病理过程中发挥着重要作用。但在鱼类中对半胱氨酸蛋白酶抑制剂的研究却很少。本研究发现并鉴定分析了大菱鲆(Scophthalmus maximus)半胱氨酸蛋白酶抑制剂B(SmCytB)。SmCytB的开放阅读框长度为300bp,编码99个氨基酸残基,与多种鱼类Cystatins B的序列具有较高的同源性,并具有Cystatins B的保守性功能活性位点。正常生理条件下,SmCytB在肌肉、脑、心脏,肝脏的表达量较高,而在脾脏、血液、腮、肾中表达量相对较低;细菌侵染时,肾、脾、肝、脑中SmCytB表达量显著上升,而在肌肉、心脏中表达量水平变化不大。体外原核表达重组的SmCytB具有半胱氨酸蛋白酶抑制活性。SmCytB在大菱鲆头肾巨噬细胞过量表达能显著增强巨噬细胞杀菌能力,且这种增强机制不依赖于一氧化氮途径。综上所述,SmCytB与大菱鲆的抵抗细菌感染的免疫防御密切相关。