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利用微生物细胞不对称还原前手性物质合成手性化合物的方法具有高效和高立体选择性等特点,已成为手性合成中最具发展潜力的方法之一。其中改变反应的介质环境,也是改进手性合成的一个重要研究方向。本工作选择了粗状假丝酵母Candida valida不对称还原苯乙酮作为模型反应,研究了高压CO2环境对该反应的影响。 首先考察了经高压CO2处理的Candida valida细胞常压下不对称还原苯乙酮的反应情况。结果发现,与未处理的细胞一样,经处理后的Candida valida细胞能高效地催化苯乙酮的不对称还原,生成R型对映体过量的α-苯乙醇,但是反应的e.e.值只有70～80%。通过考察细胞的处理时间、压力以及温度等因素对随后常压反应的影响,发现随着处理时间的延长、压力的增加以及温度的增高,会使产物的得率明显下降,而e.e.值呈现略微的变化。 其次,考察了在高压CO2环境下Candida valida不对称还原苯乙酮的反应特性。考察了底物浓度、细胞用量、反应温度、压力、反应体系pH值、辅助底物以及搅拌作用等因素对反应的影响,发现Candida valida在高压CO2环境下仍具备良好的不对称还原苯乙酮的能力。确定的最佳反应条件为:反应体系为20mlPBS（0.2mol/L,pH7.0）缓冲液,苯乙酮初始浓度24.4mmol/L,辅助底物为葡萄糖0.1g/ml,细胞用量0.4g/ml,在6.0MPa、30℃条件下反应30h。α-苯乙醇得率最高可达90%以上,e.e.值为80～90%。与常压静置反应相比,α-苯乙醇得率增加了30～40%,e.e.值也提高了10%左右。 最后,尝试控制高压CO2环境下Candida valida不对称还原苯乙酮的立体选择性,考察了热预处理细胞、改变细胞培养条件以及菌种等方法,发现好氧发酵的处于对数生长期的细胞表现出更好的反应立体选择性;热预处理细胞并没有使反应的e.e.值提高;Candida valida比面包酵母催化反应的产物得率更高,后者得到的是S型对映体过量的α-苯乙醇。高压CO2环境下重复利用Candida valida三次,反应的产物得率和e.e.值都有明显下降。