大鼠胚胎着床时支配子宫的植物性神经对β-catenin、Wnt-1表达的影响

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生殖活动是由神经、内分泌和免疫系统共同参与的过程,妊娠过程是一个复杂的生理过程,而一个成功的妊娠过程中胚胎着床是非常重要的,在着床窗口期胚囊经过附着、粘附、渗透和滋养层浸润来完成着床过程。这个过程是神经递质、内分泌激素、细胞因子和免疫细胞协同作用的结果。Wnt信号通路作为细胞信号传导系统之一与胚胎着床联系密切。但是有关植物性神经对胚胎着床过程中Wnt细胞信号传导调节影响的资料很少。因此,本试验目的就是观察支配子宫的植物性神经损毁或功能抑制处理是否影响着床期子宫内Wnt信号通路的关键分子β-连接蛋白(β-catenin)和Wnt-1的动态表达。本试验通过手术和化学损毁方法去除或抑制支配大鼠子宫的植物性神经作用,观察大鼠着床情况;应用免疫组化法定位观察了不同处理组的大鼠在妊娠4d、5d、6d子宫中P-catenin和Wnt-1免疫阳性细胞的分布规律;应用实时荧光定量RT-PCR技术,分析β-catenin mRNA和Wnt-1mRNA的表达量的差异性。结果表明:(1)阻断支配子宫的植物性神经作用后,在妊娠5d并未看到着床点或其数量比较少,子宫腺上皮细胞发生不同程度的空泡和和核固缩现象影响了子宫腺的正常分泌,进而推迟了胚泡着床。(2)在妊娠4d-6d的大鼠子宫中,β-catenin免疫阳性细胞分布在腔上皮下边基质细胞的胞质中;Wnt-1免疫阳性细胞分布在基质细胞胞质、子宫腺上皮细胞胞质和胞膜以及子宫腔上皮细胞中偶有分布。在妊娠4d-6d子宫基质中的β-catenin和Wnt-1表达数量有所变化,且神经阻断后对其数量影响明显。正常妊娠4d中β-catenin和Wnt-1免疫阳性表达出现高峰,而在妊娠5d明显减少,妊娠6d又开始增加;交感神经和副交感神经全部阻断后,β-catenin和Wnt-1阳性基质细胞随着妊娠时间的变化呈现上升趋势,且较之正常组各阶段明显升高;阻断交感神经后,β-catenin和Wnt-1阳性基质细胞随妊娠时间的变化呈现上升趋势,但明显低于正常组各阶段的阳性表达;阻断副交感神经后,β-catenin和Wnt-1阳性基质细胞与正常组的变化趋势一致,但是在妊娠5d表达较正常5d明显增加。这些结果提示神经损毁后β-catenin和Wnt-1的表达量远远高于正常或表达量不足,通过这些变化而影响正常着床窗口期子宫内膜的正常发育,神经损毁后影响正常的表达分布,不能提供适宜的胚泡发育及着床的内环境,从而使胚泡着床延迟或着床数减少。我们通过qRT-PCR法mRNA的水平也发现了同样的变化规律,进一步验证了结果可靠。总之,支配子宫的植物性神经损毁影响胚胎着床使胚胎着床延迟或着床数减少,妊娠早期子宫中的β-catenin及Wnt-1的表达异常可能是神经影响胚胎着床的重要机制之一。
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