论文部分内容阅读
背景及目的:环氧化酶（cyclooxygenase,COX）是催化花生四烯酸合成前列腺素（PGs）的限速酶,它有两种异构体:COX-1和COX-2。COX-1表达于大多数组织,通过产生PGs调控机体正常的生理功能。COX-2为诱导性表达,在细胞因子、生长因子、炎症介质、促癌剂及一些癌基因产物等的诱导下迅速合成,并导致组织中PGs合成增加,其中PGE2是强烈的免疫抑制物,在肿瘤的生长、增殖和凋亡过程中发挥着重要作用。COX-2在肿瘤发生的多个阶段均起着重要作用,包括诱导肿瘤血管形成、抑制肿瘤细胞凋亡、抑制机体免疫功能、提高肿瘤的转移和侵袭能力等。COX-2抑制剂可以抑制COX-2的活性和/或PGE2的合成,从而达到阻抑肿瘤发生发展的目的。熊果酸（ursolic acid,UA）是白花蛇舌草等天然药物的主要活性成份,可通过细胞毒和诱导细胞凋亡作用发挥抗肿瘤活性。UA对人乳腺上皮细胞和口腔上皮细胞具有抑制COX-2表达和PGE2合成的作用。我们初步研究了UA对人胃腺癌细胞SGC-7901的增殖抑制和诱导凋亡作用,并研究了COX-2途径和Bcl-2、Bax在其中的作用,探讨UA作为COX抑制剂对消化道肿瘤发挥的化学预防作用。 方法:人胃腺癌细胞株SGC-7901传代培养,UA试验浓度为20、30、40、50μmol/L,作用时间为12、24、36、48h。采用MTT法观察UA对SGC-7901细胞的增殖抑制作用,并观察了外源性PGE2对UA增殖抑制作用的影响;流式细胞术检测UA对细胞周期和细胞凋亡率的影响;Western blot法检测UA作用后COX-2、Bcl-2、Bax蛋白表达水平的改变;采用放射免疫分析法检测UA对SGC-7901细胞合成PGE2的影响。 结果:UA对细胞的增殖抑制作用呈明显浓度和时间依赖性;外源性PGE2并不能逆转UA的抑制作用;UA可将细胞阻滞于G1期,表现为G0/G1期比例增加,S期大致降低,而G2期无明显改变,随着UA浓度增加,细胞凋亡率增加,表现为逐渐升高的凋亡峰;Western blot结果显示UA作用细胞后,COX-2表达降低;随着UA浓度的增加,细胞Bcl-2的表达也降低,但Bax无明显改变。UA作用24小时后,PGE2的合成水平降低,但UA的作用无浓度依赖性。