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本文对螺旋藻的培养优化及其生物活性物质进行了研究.以提高螺旋藻直线型变异株Sp-Dz胞内活性物质的含量为目的,对影响Sp-Dz生长及胞内藻蓝蛋白和多糖含量的各理化因子进行了系统的探讨,并研究了螺旋藻藻蓝蛋白和多糖的抗肿瘤、抗氧化活性.主要结果如下:
1、通过螺旋藻变异株Sp-Dz的培养及培养条件的优化,确定了Sp-Dz的适宜培养条件为:接种密度0.2(OD560),光强35001ux,温度25℃,初始pH值10.0,以尿素为氮源添加量为0.8g/L.
2、通过对影响螺旋藻变异株Sp-Dz藻蓝蛋白和多糖含量理化因子的研究表明,当温度25℃、光强35001ux、初始pH 9.5、尿素用量0.8g/L、葡萄糖添加量2.0g/L时,藻蓝蛋白含量最高;当温度30℃、光强45001ux、初始pH 9.5、尿素用量0.4g/L、葡萄糖添加量2.0g/L时,多糖含量最高.
3、采用DEAE-Sepharose Fast Flow、SDS-PAGE凝胶电泳、紫外-可见光谱、红外光谱等对藻蓝蛋白及多糖产品进行分析,结果显示:藻蓝蛋白纯度(OD620/OD280)为3.74,与试剂级4.0接近,亚基分子量为35.9kDa,最大紫外吸收位于620nm处,二级结构主要以α-螺旋结构为主;螺旋藻多糖组成单糖为吡喃糖,成苷的半缩醛羟基主要为α-构型.
4、藻蓝蛋白对DPPH自由基和·OH自由基均有一定清除作用,且对DPPH自由基的清除率可高达77％;而多糖对DPPH自由基和-OH自由基的清除效果比较差.多糖和藻蓝蛋白对肿瘤细胞都均有一定抑制效果,其中藻蓝蛋白对BEL-7402抑制效果最强,当其浓度为400ug/mL时,抑制率可达31％,而多糖对HL-60抑制效果最好,在同样浓度下,抑制率可达51％.