慢性束缚应激对C57BL/6小鼠毛囊细胞凋亡与毛发生长周期的影响

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目的:1.建立慢性心理应激模型—慢性束缚应激(Chronic restraint stress,CRS),观察束缚应激对小鼠毛发生长周期的影响。2.研究小鼠皮肤毛囊细胞凋亡相关因子Bax、Bcl-2和免疫相关因子TNF-R1、C-Kit、C-Fos在应激过程中的改变,对毛发生长周期的影响以及抗氧化剂的作用。探讨心理压力或应激与脱发之间的关系,为脱发等疾病的治疗提供新的实验依据和思路。方法:把C57BL/6雄鼠随机分成3组,CRS组、Control组和CRS+抗氧化剂组(Tempol组)。取脱毛后的第9天和第19天的小鼠,对小鼠进行行为学的评估,体重的测量,皮肤颜色的观察,皮肤组织学观察以及血浆皮质酮的水平的检测,应用免疫组织化学法(Immunohistochemistry,IHC)检测皮肤毛囊的相关因子VEGF、Bax、Bcl-2、TNF-R1、C-Kit、C-Fos的表达。结果:1.小鼠的慢性束缚应激的相关结果和毛囊的组织学观察结果(1)和Control组小鼠相比,CRS组、Tempol组的小鼠体重显著降低(P<0.05),旷场实验时,3min内直立次数、运动距离均显著降低(P<0.05),血浆皮质酮的水平显著升高(P<0.05);(2)在脱毛后第9天,和Control组小鼠相比,CRS组小鼠的皮肤为粉色,毛囊平均分和VEGF的免疫组织化学染色得分显著降低(P<0.05),生长期推迟出现;和CRS组相比,Tempol组小鼠的皮肤为灰色,毛囊平均分显著的升高(P<0.05)。在脱毛第19天,和Control组小鼠相比,CRS组小鼠的皮肤为黑色,毛囊平均分显著降低(P<0.05),VEGF的免疫组织化学染色得分显著升高(P<0.05),退行期推迟出现;和CRS组小鼠相比,Tempol组小鼠的皮肤为灰色,毛囊平均分均显著降低(P<0.05)。2.小鼠的皮肤毛囊的细胞凋亡相关因子Bax、Bcl-2和免疫相关因子TNF-R1、C-Kit、C-Fos免疫组织化学染色结果(1)在脱毛后第9天时,和Control组小鼠相比,CRS组、Tempol组的小鼠皮肤组织毛囊的Bax、Bcl-2、TNF-R1、C-Kit、C-Fos免疫组化染色得分均显著升高(P<0.05),Bax/Bcl-2的比值显著上升(P<0.05);和CRS组小鼠相比,Tempol组小鼠皮肤毛囊的Bax、Bcl-2、TNF-R1、C-Kit、C-Fos免疫组织化学染色得分均显著下降(P<0.05),Bax/Bcl-2的比值显著下降(P<0.05)。(2)在脱毛后第19天,和Control组小鼠相比,CRS组小鼠的皮肤毛囊的Bax、Bcl-2、TNF-R1、C-Kit、C-Fos免疫组织化学染色得分均显著下降(P<0.05),Bax/Bcl-2的比值显著下降(P<0.05);和CRS组小鼠相比,Tempol组小鼠皮肤毛囊的Bax、Bcl-2、TNF-R1、C-Kit、C-Fos免疫组织化学染色得分均显著升高(P<0.05),Bax/Bcl-2的比值显著升高。结论:1.慢性束缚应激影响毛发的生长周期,导致毛发生长周期的异常,表现为推迟进入毛发生长期。2.在脱毛后第9天时,慢性束缚应激可以导致小鼠皮肤毛囊的细胞凋亡相关因子Bax、Bcl-2免疫组织化学染色得分均显著升高,Bax/Bcl-2的比值升高,小鼠的皮肤毛囊进入细胞凋亡的状态,生长期推迟出现。3.在脱毛后第19天时,慢性束缚应激对毛发生长并不起主导作用,毛发生长遵循自身的毛发生长生物钟。4.抗氧化剂可部分的逆转慢性束缚应激对毛发生长周期的负性影响。
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