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目的：探讨Exosomal miRNA在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者外周血血清中的表达情况和临床意义,寻找NSCLC相关的血清学肿瘤标志物。方法：本课题以76例NSCLC患者和76例正常人外周血血清(以下简称病理组和对照组)为研究对象。1)通过Western blot分析血清是否表达Exosome蛋白。2)最新的几个高通量芯片筛查试验结果提示：Let-7a、miR-21、miR-19b、miR-146a、 miR-182、miR-451、miR-486、miR-210、miR-205、miR-155共10种miRNA与NSCLC高度相关。本课题采用RT-PCR在病理组和对照组中检测这10种Exosomal miRNA的相对表达水平。3)筛选表达差异显著的Exosomal miRNA并进一步验证,比较两组间的表达差异并分析病理组Exosomal miRNA的表达与临床病理特征的关系。4)从肿瘤miRNA组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库下载非小细胞肺癌miRNA表达数据,根据临床数据和目标miRNA筛选本课题所需要的样本。随后与步骤3所得Exosomal miRNA结果进行比较。结果：1) Western blot结果显示：两组血清均表达Exosome表面标志分子CD63,证明两组均表达Exosome蛋白。其中Exosome蛋白在NSCLC患者中的表达明显高于对照组(P<0.05)。2)上述10种Exosomal miRNA的筛选结果显示：Exosomal Let-7a、miR-21、 miR-19b、miR-146a、miR-182、miR-486、miR-205、miR-155在NSCLC患者外周血血清中呈高表达(P<0.05),其中Exosomal Let-7a、lmiR-21、miR-19b、miR-146a、miR-205显著高表达,其表达变化倍数大于2。与此相反的是,Exosomal miR-451、miR-210在NSCLC患者外周血血清中呈低表达(P<0.05)。3)‘选取Exosomal Let-7a、miR-21、miR-19b、miR-205、miR-451、miR-210进行进一步验证实验,结果表明Exosomal Let-7a、miR-21、miR-19b、miR-205在NSCLC患者外周血血清中的表达水平显著升高(P<0.05),而Exosomal miR-451、miR-210在NSCLC患者外周血血清中的表达水平则显著降低。Let-7a、miR-21在Ⅰ～Ⅱ期NSCLC患者中的表达水平显著低于在Ⅲ-Ⅳ期的表达水平(P<0.05)。同时,Exosomal miR-451、miR-210在Ⅰ～Ⅱ期的表达水平则显著高于在Ⅲ-Ⅳ期的表达水平(P<0.05)。随着淋巴结的转移,Exosomal Let-7a、miR19b、miR-205的表达水平显著升高(P<0.05)。相比鳞癌,Exosomal Let-7a、miR-21、miR19b、miR-205、miR-210在腺癌患者中表达水平显著升高(P<0.05)。发生远处转移的NSCLC患者中Exosomal Let-7a、miR-21、miR-19b、miR-205的表达水平显著高于在未发生远处转移的患者中的表达水平(P<0.05),发生远处转移的NSCLC患者中Exosomal miR-451、miR-210的表达水平显著低于在未发生远处转移的患者中的表达水平(P<0.05)。相比在病灶<5cm的NSCLC患者中的表达水平,Exosomal Let-7a、miR-21、miR-19b、miR-205在病灶>5cm的NSCLC患者中的表达水平显著升高(P<0.05),而同样情况下,Exosomal miR-210的表达水平则显著降低(P<0.05)4) TCGA数据库数据与本实验Exosomal miRNA的比较结果显示：相对于在外周血血清Exosome中的高表达,Let-7a在NSCLC组织中却呈现为低表达。相对于在外周血血清Exosome中的低表达,miR-210在NSCLC组织中却呈现为高表达。而miR-21、miR-19b、miR-205、miR-451在两者中的表达没有明显差异性(P>0.05)。结论：Exosomal miRNA在NSCLC患者外周血血清中明显表达异常,且其表达水平与临床病理资料密切相关。同时,其表达水平与NSCLC病理组织miRNA的表达水平并不完全一致,其差异表达的miRNA有待进一步探索研究。总而言之,血清Exosomal miRNA的检测有助于NSCLC的诊断,在NSCLC的诊断治疗中具有远大的发展潜力,有望在未来成为NSCLC乃至其他恶性肿瘤的血清学肿瘤标志物。