抗生素被广泛地应用于治疗人及动物的各种细菌性感染疾病,而兽医在用药时,如果将不同的抗生素联合使用,很容易造成多种抗生素药物在动物体内残留,从而导致动物源性食品的污染,对人体的健康造成损害。为了提高动物源性食品的安全性,建立高效、准确、灵敏的抗生素检测方法显得尤为重要。本论文构建了基于核酸适配体及量子点的电化学方法对链霉素、氯霉素、四环素进行同时检测分析,具体如下:适配体(Ap-DNA)序列是能够与靶物质高特异性结合的寡核苷酸序列,本文选用的三段适配体序列分别能够与链霉素、氯霉素和四环素这三种抗生素特异性结合。以适配体序列为模板,分别设计了三段与适配体部分互补的DNA1(cDNA1)序列。以cDNA1序列为模板,分别设计了三段与其3’端部分互补的捕获探针(Cap-DNA)序列和三段与其5’端部分互补的DNA2(cDNA2)序列。通过水相合成法,利用巯基乙酸作为配体,分别合成了硫化铅(PbS)、硫化镉(CdS)和硫化锌(Zn S)三种水相量子点。将量子点与链霉亲和素(SA)通过羧基与氨基的缩合反应相偶联,得到标记有链霉亲和素的量子点(QDs-SA)并使之与标记有生物素的cDNA2孵育,通过生物素-亲和素系统的牢固结合力,使得量子点连接到cDNA2上(QDs-cDNA2)。构建了基于适配体和量子点的电化学传感器,设计的cDNA1序列首先和Ap-DNA序列的中间部分杂交形成双链DNA,当样品中存在待检测的抗生素时,由于Ap-DNA序列与抗生素拥有更高的亲和性从而优先与其对应的抗生素结合,使得双螺旋解链并释放出cDNA1序列;游离cDNA1通过其3’端序列与事先自组装修饰在金电极表面的Cap-DNA序列结合;随后将制备好的QDs-cDNA2序列进一步与c DNA1的5’端序列杂交;经过上述过程,量子点最终引入到金电极表面,经硝酸酸溶后利用方波溶出伏安法(SWASV)检测,得到对应的溶出伏安峰即PbS、CdS、ZnS的峰位置分别为-0.6 V、-0.8 V、-1.1 V,其峰电流值的大小分别反映了样品中链霉素、氯霉素、四环素的浓度。在单独检测链霉素、氯霉素和四环素中的一种抗生素时,分别使用该抗生素对应的Cap-DNA、Ap-DNA、cDNA1和cDNA2序列,并对每种序列的浓度进行了优化,得到的链霉素、氯霉素、四环素的检测范围分别是10~5000 nmol·L-1,5~3000 nmol·L-1及20~8000 nmol·L-1,检测限分别为10 nmol·L-1、5 nmol·L-1和20 nmol·L-1。利用高效液相色谱(HPLC)法与文中建立的电化学方法分别对不同浓度的三种抗生素标准样品进行检测,验证了该电化学方法具有较高的准确性。当同时检测三种抗生素时,分别使用三种抗生素对应的Cap-DNA、Ap-DNA、cDNA1和cDNA2序列,采用与单独检测一种抗生素时相同的实验操作步骤。利用循环伏安法(CV)和电化学阻抗谱(EIS)对电极修饰和检测过程的各个步骤进行了表征,证明了建立的电化学方法同时检测链霉素、氯霉素和四环素的可行性,并验证了与实验原理的一致性。进一步对含有此三种抗生素的牛奶样品进行检测,并考察其稳定性。检测结果与标准样品的检测结果趋势基本一致且重复性良好,说明本方法能够应用于实际样品的检测。