【摘 要】
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目的筛选和鉴定重组青霉素结合蛋白2a(PBP2a)转肽酶区蛋白的核酸适配体。方法利用指数富集的配体系统进化技术(SELEX),以重组PBP2a转肽酶区蛋白为靶标,从单链DNA文库中筛选能
【机 构】
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广州医科大学附属第三医院检验科,广州医科大学金域检验学院
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目的筛选和鉴定重组青霉素结合蛋白2a(PBP2a)转肽酶区蛋白的核酸适配体。方法利用指数富集的配体系统进化技术(SELEX),以重组PBP2a转肽酶区蛋白为靶标,从单链DNA文库中筛选能与之特异性结合的核酸适配体。筛选产物克隆测序后,对其进行结构分析和特性鉴定。结果经过11轮筛选,单链DNA文库与靶标蛋白的亲和力趋向稳定,将第8、10轮筛选产物克隆测序,对获得的40个适配体进行分析,一级结构分析显示40个适配体并无共同的保守序列,二级结构预测分析表明,其可分为3个家族。其中13号适配体与重组PBP2a蛋白亲和力最高,并能与之特异性结合。结论利用SELEX技术成功筛选出特异性结合重组PBP2a转肽酶区蛋白的核酸适配体,为探索耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的诊疗新途径奠定基础。
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