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目的:研究丹参酮ⅡA对生长期大鼠峰值骨量和去卵巢大鼠骨质量的影响与机制,为开发抗骨质疏松中药单体新药奠定基础,并考察适用于工业化生产的丹参酮ⅡA提取分离工艺。方法:丹参酮ⅡA对生长期大鼠峰值骨量的影响研究,使用1月龄雌性Wistar大鼠30只,随机分为丹参酮ⅡA组、淫羊藿苷组和正常对照组,每组10只;丹参酮ⅡA对去卵巢大鼠骨密度和骨质量的影响研究,使用3月龄Wistar雌性大鼠40只,分为Sham组、OVX组、雌激素治疗组和丹参酮ⅡA治疗组,每组10只,两次动物实验都是每两周称取一次体重,每月用DEXA检测一次大鼠全身骨密度,待各组间出现统计学差异时,将所有实验动物处死并取材,测定椎骨和股骨的离体骨密度、进行骨生物力学分析、胫骨近端不脱钙切片VG染色及骨形态计量学分析和Micro-CT扫描;ELISA法检测血清骨吸收指标TRACP 5b和骨形成指标OC的水平,分析大鼠体重、主要脏器的病理学变化等。采用加热回流提取法从5个不同产地丹参药材中提取丹参酮ⅡA,用HPLC法测定样品中丹参酮ⅡA的含量,采用正交设计实验法,以丹参酮ⅡA的含量为评价指标,考察加热回流提取法的溶剂浓度、溶剂用量、提取时间、提取次数4个因素对提取结果的影响,从而优选最佳提取工艺;比较直接沉淀法、水沉法和碳酸钠洗涤法对提取液中丹参酮ⅡA含量的影响,筛选出适于丹参酮ⅡA工业化生产最佳分离工艺。结果:1.口服丹参酮ⅡA两个月后生长期大鼠的全身BMD,椎骨和股骨BMD、骨小梁数目、骨小梁厚度、骨小梁面积和血清OC的水平均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);骨小梁分离度和血清TRACP 5b显著低于对照组,差异也具有统计学意义(P<0.05);丹参酮ⅡA组和淫羊藿苷组没有统计学差异(P>0.05)。给药组的体重与对照组无差别,主要脏器无病理学改变。2.口服丹参酮ⅡA可抑制去卵巢大鼠的骨量流失。与OVX组相比,丹参酮ⅡA组的全身及离体BMD、股骨和椎骨最大载荷均明显提高,差异有统计学意义(P<0.05),给药组大鼠骨小梁明显变多变密,Micro-CT扫描及分析结果与不脱钙切片的骨形态计量分析结果相一致;雌激素组大鼠体质量明显降低,与OVX组间有统计学意义(P<0.01)。OVX组子宫内膜组织萎缩变薄,丹参酮ⅡA组与Sham组相差不大,雌激素组子宫内膜明显增厚。丹参酮ⅡA组大鼠的子宫系数较OVX组略高,但明显低于雌激素组,差异有统计学意义(P<0.01)。3.陇南丹参、河北丹参、岷县丹参、内蒙丹参和甘西鼠尾草中所含的丹参酮ⅡA的量分别为0.10%、0.25%、0.16%、0.10%、0.23%;筛选出提取甘西鼠尾草药材中丹参酮ⅡA的最佳提取工艺为:加入6倍量的95%乙醇,加热回流提取2次,每次提取1h;筛选出提取物中丹参酮ⅡA含量的最佳分离方法为:提取液回收乙醇至小体积,4℃静置析晶,得到赭红色粉末,并用50%乙醇重结晶,得到丹参酮ⅡA粗提物,含量达到51.12%。经验证该提取分离工艺稳定可靠、重复性好,并适用于工业化生产;结论:1.口服丹参酮ⅡA可以提高骨密度和改善骨组织微观结构,提高生长期大鼠的峰值骨量;2.口服丹参酮ⅡA可抑制去卵巢大鼠的骨吸收活性而提高其骨形成活性,从而显著减少骨量流失,预防骨质疏松的发生,并且其对子宫的副作用较雌激素小。3.采用正交设计实验法,优选出加热回流提取甘西鼠尾草药材中丹参酮ⅡA的最佳提取工艺;优选出提高提取液中丹参酮ⅡA含量的分离纯化方法,并且此提取分离工艺操作简单、有效;