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国际癌症研究机构和世界卫生组织将空气颗粒物界定为1级致癌物。石英粉尘同时又是中国最主要的职业危害因素之一,细颗粒物属于吸附性较强的物质,因此其容易变成空气中毒性物质的携带者,通过肺泡毛细血管进入人体的循环系统,从而影响人的身体健康。Th17和Treg作为初始CD4+T细胞的两个新亚型近年以来一直是研究热点之一。ROR γt是人和鼠Th17细胞中非常重要的转录因子,它是表达在免疫细胞上的RORγ的特异性亚型,能够有效促进Th17细胞分化,并可以对Th1细胞中特异性效应因子IL-17的表达和分泌进行调节。这种转录因子分布的组织器官较多,比较主要的包括胸腺、肌肉、肝脏等,另外,它能够参与淋巴结发育和免疫反应,与Th17细胞的形成具有密不可分的关联,并且很大程度上影响人体的自身免疫性、感染性疾病以及肿瘤的生成。本实验以小鼠为研究对象,设定低浓度颗粒物组、中浓度颗粒物组、高浓度颗粒物组,同时以金黄色葡萄球菌感染做对照,设定低浓度金葡菌组、中浓度金葡菌组、高浓度金葡菌组,生理盐水组。通过气管灌注颗粒物的方式感染小鼠,检测其肝脏、脾脏、肺脏组织的RORγ t mRNA表达量变化和蛋白表达量变化;同时采集小鼠肝脏、脾脏、肺脏组织为试验样本,通过HE染色技术,观察组织器官病理学变化;与金黄色葡萄球菌感染的小鼠相比较,推测颗粒物作为刺激源对机体免疫细胞的影响。主要研究结果如下:1.实验组小鼠体重与对照组相比有较明显变化,且颗粒物浓度越高,菌液浓度越高,小鼠体重增长缓慢越明显。其中颗粒物中浓度组和颗粒物高浓度组小鼠食量减少,毛发无光泽且变稀疏,精神沉郁;且颗粒物中浓度组和颗粒物高浓度组小鼠从灌肺第5天开始有咳嗽的症状。2.荧光定量PCR结果显示:在脾脏、肺脏中,ROR-γt因子的表达量与细颗粒物浓度有明显关系,颗粒物浓度越高,ROR-γt因子的表达量越高。其中肺脏作为直接受到刺激的器官,在浓度由10mg/ml提高到20mg/ml时ROR-γ t因子表达量显著增加(p<0.05)。而肝脏中ROR-γt因子的表达量的变化倍数明显没有其他两个器官高;当颗粒浓度为20mg/ml时,肝脏和肺脏中ROR-γt因子的表达量与金黄色葡萄球菌浓度为2*10^10cfu/ml时相近;颗粒浓度为40mg/ml时,脾脏中ROR-γt因子的表达量与金黄色葡萄球菌浓度为1*10^11 cfu/ml时相近。3.蛋白印迹结果显示,在肝脏和肺脏中,ROR-γt蛋白的表达量与细颗粒物浓度有明显关系,颗粒物浓度越高,ROR-γt蛋白的表达量越高;在脾脏中,在颗粒物浓度达到40mg/ml时,ROR-γ t蛋白的表达量才有明显增加(p<0.05)。当颗粒浓度为40mg/ml时,肺脏中ROR-γt蛋白的表达量与金黄色葡萄球菌浓度为2*10^10cfu/ml时相近;颗粒浓度为20mg/ml时,肝脏和脾脏中ROR-γt蛋白的表达量与金黄色葡萄球菌浓度为1*1 0^11cfu/ml时相近。4.切片结果显示,在细颗粒物的刺激下,肺脏受损最为严重,实验组小鼠均有不同程度的支气管扩张和肺泡受损,脾脏在受到刺激后也产生了大量免疫细胞而肝脏并无明显的变化。本实验通过进行外源性刺激,对不同实验组小鼠的细胞免疫因子ROR γt的表达以及小鼠部分器官组织的病理性变化进行分析,对大气细颗粒污染物造成机体的损伤,以及进一步的深入研究提供基础,为大气污染问题以及环境保护问题提供依据,为今后颗粒物污染的治疗提供了新思路和药物干扰的途径。