【摘 要】
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背景:镁离子及白藜芦醇对脂肪间充质干细胞（Adiposederived mesenchymal stem cells,ADMSCs）成骨分化起促进作用,但两者协同对ADMSCs成骨作用及机制尚不明确。目的:探讨镁离子协同白藜芦醇对ADMSCS增殖、成骨分化、迁移能力的影响,并阐述其可能的机制。方法:将ADMSCs培养于含有不同浓度的镁离子或白藜芦醇的完全培养基中,通过CCK-8筛选镁离子和白藜芦醇
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背景:镁离子及白藜芦醇对脂肪间充质干细胞（Adiposederived mesenchymal stem cells,ADMSCs）成骨分化起促进作用,但两者协同对ADMSCs成骨作用及机制尚不明确。目的:探讨镁离子协同白藜芦醇对ADMSCS增殖、成骨分化、迁移能力的影响,并阐述其可能的机制。方法:将ADMSCs培养于含有不同浓度的镁离子或白藜芦醇的完全培养基中,通过CCK-8筛选镁离子和白藜芦醇的最适作用浓度,并根据其最适浓度,将实验分为四组:空白对照组、镁离子组、白藜芦醇组、镁离子协同白藜芦醇组,通过EdU、CCK-8观察细胞增殖;通过活/死细胞染色检测细胞活性;通过测定碱性磷酸酶活性观察成骨分化;通过甲苯胺蓝、阿尔新蓝染色观察成软骨分化;通过油红染色观察细胞成脂肪分化;通过划痕、Transwell实验观察细胞迁移能力;采用WGCNA、GSEA分析SIRT1/Notch分子网络,揭示其相关通路,并采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和Western Blot方法验证成骨分化相关分子表达差异,以及SIRT1/Notch及下游相关因子的表达水平。结果:（1）CCK-8筛选出最适作用浓度为8mmol/l镁离子、100μmol/l白藜芦醇;（2）活死细胞染色结果显示镁离子、白藜芦醇对ADMSCs活力形态无明显影响,EdU、CCK-8表明D组增殖最显著（P<0.05）;（3）ADMSCs具有多向分化潜能,D组成骨分化最显著（P<0.05）,4个实验组均无显著成成脂分化;（4）划痕、Transwell实验结果显示镁离子协同白藜芦醇可促进ADMSCs迁移（P<0.05）;（5）WGCNA、GSEA结果显示,MAPK信号通路是SIRT1/Notch高相关性通路,qRT-PCR和Western Blot结果显示镁离子协同白藜芦醇可上调SIRT1/Notch轴及MAPK信号通路表达。结论:镁离子协同白藜芦醇提高ADMSCs增殖、成骨分化、迁移能力,与SIRT1/Notch轴及下游相关因子激活相关。
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