奥曲肽对PAAF诱导的大鼠肝细胞凋亡的保护作用的实验研究

来源 :昆明医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:suibianyidianyaoshi
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目的:探讨生长抑素类似物奥曲肽(善宁)对胰腺炎相关性腹水(PAAF)诱导的大鼠肝细胞凋亡的保护作用及其相关机制。方法:以PAAF诱导的SD大鼠肝损伤模型为研究对象,将48只SD大鼠(雌雄不拘)随机分为3组,每组16只。A组(空白对照组)腹腔内注射生理盐水8ml/只;B组(模型对照组)腹腔内注射PAAF8ml/只:C组(奥曲肽治疗组)在向腹腔内注射PAAF8ml/只前1h于背部皮下注射奥曲肽4μg/Kg,并在注射PAAF后2h、5h两次于相同部位皮下注射奥曲肽20μg/Kg;相应地A、B两组仅以等容积的生理盐水替代。各组动物自由饮水进食,腹腔注射后4h、7h分批处死大鼠,每时间点8只。测定大鼠肝功能血清学指标(ALT、AST、TBiL)、血清淀粉酶(AmYL)及转化生长因子-β1(TGF-β1)浓度。荧光显微镜观察肝细胞凋亡形态学改变;透射电子显微镜观察胰腺、肝组织亚细胞结构变化:TUNEL法流式细胞术(FCM)定量检测肝细胞凋亡率及其周期分布情况。结果:B组肝细胞损伤明显,C组较之有显著改善。同时间段比较分析提示:B组血清ALT、AST、TBiL、AmYL及TGF-β1浓度比A组明显升高(P<0.01);与B组相比,C组上述各指标显著下降(P<0.001~0.05);ANP组与B组相比,7h时间点AmYL浓度差异有非常显著性(P<0.001)。B组中PAAF诱导7h后流式细胞仪显示20.13±3.84%的细胞发生凋亡,其中49.04±1.44%细胞生长停滞在G2/M期,肝细胞凋亡率与A、C两组比较差异有显著性(P<0.05);荧光显微镜可观察到发强黄绿色荧光的凋亡小体,电镜下见典型的晚期凋亡肝细胞,胞浆内有特异性的核碎片。ANP组胰腺腺泡细胞电镜下大多数细胞坏死崩解,无细胞结构,与B组相比形态学改变差异非常显著。结论:1.PAAF诱导的大鼠肝损伤模型中的胰腺病变明显不同于急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠的胰腺病变:2.奥曲肽通过有效降低TGF-β1的血清浓度,减轻肝脏网状系统硕士研究生论文和Kuffer细胞的应激作用,抑制AP时肝细胞凋亡程序,从而对R入AF诱导的大鼠肝细胞凋亡具有良好的保护作用。
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