低频脉冲电磁场促进大鼠脊髓损伤后神经功能恢复

来源 :安徽医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cxz2004
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目的:低频脉冲电磁场(Low frequency pulsed electromagnetic field,LFPEMF)已经被证实对神经系统具有保护和营养作用。然而,有关LFPEMF是否可以治疗脊髓损伤(Spinal cord injury,SCI)及其治疗机制未见有所报道。因此,本研究旨在探讨LFPEMF是否可以促进大鼠SCI后神经功能的恢复及其可能治疗机制。方法:将SD大鼠随机分为假手术组、脊髓损伤组和治疗组,并利用NYU打击器构建SCI模型。大鼠运动功能BBB评分(Basso-Beattie-Bresnahan,BBB)和经颅磁运动诱发电位(Transcranial magnetic motor evoked potentials,tc MMEPs)用于评估大鼠SCI后神经功能恢复情况;苏木精-伊红染色(Hematoxylin and eosin,HE)和卢卡斯快蓝染色(Luxol fast blue,LFB)用于评估大鼠SCI后脊髓组织损伤严重程度;组织免疫荧光染色(Immunofluorescence,IF)和蛋白质印迹法(Western Blot,WB)用于评估大鼠SCI后少突胶质细胞分化成熟情况;甲苯胺蓝染色(Toluidine blue,TB)用于评估大鼠SCI后髓鞘再生情况,包括有髓纤维数量和髓鞘厚度;WB和酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)用于评估大鼠SCI后神经营养因子和炎症因子的表达情况。实验对象的随机分配、大鼠脊髓损伤模型的建立、数据采集、数据分析等研究过程均遵守“盲法”。结果:(1)BBB运动功能评分结果表明术后3-8周时,治疗组大鼠平均BBB评分在各个时间节点均明显高于脊髓损伤组大鼠平均BBB评分,并且差异具有统计学意义(P<0.05);(2)tc MMEPs结果表明术后2-8周时,治疗组大鼠相比脊髓损伤组大鼠表现出更短的潜伏期和更高的振幅,并且差异具有统计学意义(P<0.05);(3)HE染色结果表明术后14天时,治疗组大鼠SCI程度明显轻于脊髓损伤组,并且差异具有统计学意义(P<0.05)。LFB染色结果表明术后14天时,脊髓损伤组大鼠脊髓组织的破坏程度和脱髓鞘改变相比治疗组更加严重,并且差异具有统计学意义(P<0.05);(4)IF染色结果表明术后4、7和14天时,治疗组大鼠脊髓组织中成熟少突胶质细胞数量明显高于脊髓损伤组,并且差异具有统计学意义(P<0.05)。WB结果表明术后7天时,治疗组大鼠脊髓组织中髓磷脂碱性蛋白(Myelin basic protein,MBP)表达水平相比脊髓损伤组明显升高,并且差异具有统计学意义(P<0.05);(5)TB染色结果表明术后1、2和3周时,治疗组大鼠脊髓组织中有髓纤维数量和髓鞘厚度均明显高于脊髓损伤组,并且差异具有统计学意义(P<0.05);(6)WB结果表明术后3天时,治疗组大鼠脊髓组织中脑源性神经营养因子(Brain derived neurotrophic factor,BDNF)和神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)表达水平相比脊髓损伤组明显增高,并且差异具有统计学意义(P<0.05)。ELISA结果表明术后24 h时,治疗组大鼠脊髓组织中肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)表达水平相比脊髓损伤组明显降低,并且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:LFPEMF可以通过促进少突胶质细胞分化成熟进而促进髓鞘再生,以及抗炎作用和神经营养作用,最终促进SCI后大鼠神经功能的恢复。
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