淫羊藿黄酮的提取、分离纯化及体外抗氧化研究

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淫羊藿是我国药典收录的传统中药,大量基础研究和临床实践证明,淫羊藿具有强筋骨、祛风湿、温补肾阳的功效。本论文对淫羊藿总黄酮的提取、水解条件的考察、淫羊藿黄酮化合物的纯化及体外抗氧化活性进行了研究,为深入开展淫羊藿的开发应用奠定了基础。1.淫羊藿黄酮的提取以淫羊藿总黄酮含量为指标设计正交试验,确立最佳实验条件为70℃,25倍60%乙醇回流提取2次。利用紫外-可见分光光度法以芦丁为对照品,测得提取液中淫羊藿总黄酮的含量。2.淫羊藿黄酮水解条件的考察将淫羊藿提取物的浸膏,用80%乙醇溶解,在3mol/L盐酸溶液中,50℃水浴反应16小时。将水解液用稀NaOH溶液调节ph=7,析出沉淀,静置,过滤,干燥,得到淫羊藿黄酮产物,其中分子量为548的黄酮化合物含量最高。3.淫羊藿黄酮化合物的纯化根据黄酮化合物的极性,采用溶剂萃取法,选择乙酸乙酯-水系统,对淫羊藿黄酮化合物粗品进行萃取,除去溶于水的杂质,得到含量较高的黄酮化合物,分子量为548。利用高速逆流色谱法分离此化合物,该方法溶剂体系为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(3∶7∶3.5∶6.5,v/v/v/v),以下相为流动相,流速为2.0mL/min,转速为900rpm/min,温度为25℃,固定相的保留率为48%。由上述方法可得纯度较高的分子量为548的淫羊藿黄酮单体。4.淫羊藿黄酮的体外抗氧化研究本论文进行了抗坏血酸Vc、淫羊藿总黄酮提取物、淫羊藿黄酮水解产物、淫羊藿黄酮萃取物和淫羊藿黄酮纯化物的体外抗氧化研究。主要建立了两个模型DPPH法和FRAP法,实验结果显示浓度和抗氧化活性成正相关。这五种样品对DPPH自由基的有效剂量依次为5.46ug/mL、132.68ug/mL、28.56ug/mL、32.34ug/mL、51.05ug/mL。
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