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猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndromevirus,PRRSV)引起的以妊娠母猪繁殖功能障碍以及不同年龄阶段猪呼吸道症状为特征的病毒性传染病。主要侵害肺泡巨噬细胞和单核细胞。PRRSV存在持续性感染、免疫抑制、抗体依赖增强作用（ADE）等免疫特征。PRRSV感染ADE是通过IgGFc受体(FcγR)介导的内吞作用促进病毒进入巨噬细胞复制。FcγR是一类能够特异亲和免疫球蛋白IgGFc片段的细胞表面分子，IgGFc受体的表达能够触发和调节多种免疫学效应，在机体免疫防御中起着极其关键的作用。猪IgGFc受体主要有FcγRⅠ（CD64），FcγRⅡ(CD32)、FcγRⅢ(CD16)三类分子组成。其中FcγRⅠ、FcγRⅢ是激活型FcγR，激活型受体主要是通过胞内域的ITAM基序或FcR-γ传递活化信号，诱导免疫反应。本研究通过探讨激活型FcγR（FcγRⅠ和FcγRⅢ）在PRRSV感染的免疫反应中的作用以及不同的抗体在PRRSV感染PAM中的作用，为该病的防治和新型疫苗研发奠定基础。本研究分别将抗PRRS特异性IgG(2.64mg/ml)和非特异性IgG（2.63mg/ml）作倍比稀释，与等体积含200TCID50/100μL的PRRSVHn-1/06株病毒液混合，制备成一系列的感染性免疫复合物（PRRSV-IgG)和阴性抗体-病毒混合液(PRRSV+IgG)，接种PAM细胞；同时将纯化的猪阴性IgG（2.63mg/ml）和兔抗猪IgG（2.64mg/ml）等体积混合制备免疫复合物（IC），分别与等体积含200TCID50/100μL的PRRSVHn-1/06株病毒液混合，制备成非感染性免疫复合物-病毒混合液(PRRSV+IC)，接种PAM细胞。接种24h后用实时荧光定量PCR方法检测PRRSV的mRNA水平。同样的方法，分别将2倍稀释的PRRSV-IgG，PRRSV+IgG和4倍稀释的PRRSV+IC接种PAM细胞；将纯化FcγRIIBIgG(550ug/ml)处理PAM细胞，制备的感染性免疫复合物和非感性免疫复合物处理PAM细胞，用实时荧光定量PCR方法分别检测感染12、24、36和48h后不同时间段内PRRSV的mRNA水平。结果显示，一定浓度的PRRS特异性亚中和水平抗体，在感染48h时间段内均能极显著促进PRRSV在PAM细胞中增殖；而适当剂量的免疫复合物，在感染48h时间段内也均能促进PRRSV在PAM细胞中增殖。PRRS特异性亚中和水平抗体和非感性免疫复合物在FcγRⅡB被封闭的情况下均能显著的促进病毒增殖。结果表明，一定浓度的PRRS特异性亚中和水平抗体通过激活型FcγR途径增强PRRSV在宿主细胞中的增殖；一定浓度的PRRS非特异性抗体及其形成的非感染性免疫复合物均通过激活型FcγR途径增强PRRSV在宿主细胞中的增殖。本研究采用将含有200个TCID50的Hn-2/06PRRSV、脂多糖（100ng/mL）、鼠阴性IgG(550μg/ml)和纯化鼠抗猪FcγRⅠIgG（550μg/ml）接种PAM细胞；同时用纯化鼠抗猪FcγRIIgG（550μg/ml）和鼠阴性IgG(550μg/ml)处理PAM细胞后接种含有200个TCID50的Hn-2/06PRRSV，各组分别培养12h、24h、36h、48h、60h、72h后收集细胞及上清，同时设健康细胞对照组，用已经建立的绝对荧光定量PCR方法检测接毒组PAM细胞中不同时间段内PRRSV复制水平以及用相对荧光定量PCR检测各组PAM细胞中IFN-α、TNF-αmRNA转录水平。结果显示，Hn-2/06PRRSV在感染PAM细胞后12-24h期间PRRSV促进IFN-α的mRNA水平，36-72h期间PRRSV抑制IFN-α的mRNA水平;TNF-αmRNA水平在感染后12h-72h均下调；用纯化鼠抗猪FcγRⅠIgG处理猪PAM后，选择性激活猪PAM细胞表面FcγRI，数据显示IFN-α、TNF-αmRNA水平显著下调，猪FcγRI选择性激活能抑制宿主细胞的抗病毒因子水平；PRRSV感染中，选择性激活猪PAM细胞表面FcγRI后显著抑制抗病毒因子IFN-α、TNF-α的转录水平，说明PRRSV感染过程中猪FcγRI选择性激活更进一步抑制了宿主细胞的抗病毒因子水平。本研究采用将含有200个TCID50的Hn-1/06PRRSV、脂多糖（100ng/mL）、鼠阴性IgG(550μg/ml)和纯化鼠抗猪FcγRⅢIgG（550μg/ml）接种PAM细胞；同时用纯化鼠抗猪FcγRⅢIgG（550μg/ml）和鼠阴性IgG(550μg/ml)处理PAM细胞后接种含有200个TCID50的Hn-1/06PRRSV，各组分别培养12h、24h、36h、48h、60h、72h后收集细胞及上清，同时设健康细胞对照组，用已经建立的绝对荧光定量PCR方法检测接毒组PAM细胞中不同时间段内PRRSV复制水平以及用相对荧光定量PCR检测各组PAM细胞中IFN-α、TNF-αmRNA转录水平。结果显示，Hn-1/06PRRSV在感染PAM细胞后12-24h期间PRRSV促进IFN-α的mRNA水平，36-60h期间PRRSV抑制IFN-α的mRNA水平，之后IFN-α的mRNA水平恢复正常；TNF-αmRNA水平在感染后12h-72h均上调。用纯化鼠抗猪FcγRⅢIgG处理猪PAM后，选择性激活猪PAM细胞表面FcγRⅢ，数据显示IFN-α、TNF-αmRNA水平显著下调，PRRSV感染中，选择性激活猪PAM细胞表面FcγRⅢ后显著抑制抗病毒因子IFN-α、TNF-α的转录水平，说明PRRSV感染过程中猪FcγRⅢ选择性激活更进一步抑制了宿主细胞的抗病毒因子水平。