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研究背景:许多慢性肾脏病(CKD)患者伴有血尿酸的升高。大量证据表明高尿酸血症是心血管和肾脏疾病的独立危险因素。尿酸主要是通过肾脏排泄的,因此肾脏疾病容易导致尿酸排泄量下降从而发生高尿酸血症。尿酸在肾脏的排泄要经过滤过、重吸收和分泌三个主要过程:尿酸在肾小球可以自由滤过,然后大部分在肾小管被重吸收,随后又有部分被重新分泌到肾小管腔,最后只有滤过的10%被排出体外。尿酸在肾小管的重吸收和分泌是由不同的转运蛋白来完成的,其中表达在刷状缘侧膜的尿酸-有机阴离子交换蛋白(URAT1)负责尿酸的重吸收,而表达在基底侧膜的有机阴离子转运蛋白1(OAT1)和OAT3负责尿酸的分泌。因此这三种蛋白的表达变化可能与CKD患者发生高尿酸血症关系密切,但目前尚未见这三种转运蛋白与高尿酸血症关系的研究报道。目的:观察伴有高尿酸血症和血尿酸正常的CKD患者肾组织OAT1、OAT3和URAT1表达水平与血尿酸以及尿尿酸水平的关系,并模仿CKD患者肾脏局部RAAS活化的特点,分别用血管紧张素Ⅱ和醛固酮刺激近段肾小管上皮细胞(HKC),从细胞水平明确三种蛋白的表达变化导致高尿酸血症的分子机制。方法:用基因免疫方法制备小鼠抗人URAT1、OAT1和OAT3多克隆抗体,并对这三种转运蛋白在肾脏的表达进行定位研究;选择血压和肾功能均正常的CKD患者40例分为高尿酸血症组(20例,血尿酸522.22±63.39μmol/L)和正常血尿酸组(20例,血尿酸293.82±65.73μmol/L),检测两组患者24小时尿尿酸水平,免疫组化方法观察两组患者OAT1、OAT3和URAT1的表达;分别用血管紧张素Ⅱ和醛固酮刺激培养的人肾小管上皮细胞系(HKC),Western blot观察OAT1、OAT3和URAT1的表达变化,并观察这种表达变化是否是通过MAPK信号通路的活化来实现的。结果:用基因免疫方法成功制备了小鼠抗人URAT1、OAT1