蓝绿温和胶电泳系统研究叶绿体生物发生和光合逆境适应

来源 :兰州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:supermilk009
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采用蓝绿温和胶电泳系统,SDS-脲-聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹,研究了豌豆叶片基质和基粒类囊体膜蛋白复合物的组成;黑暗条件下培养的大麦苗转绿过程中质体蛋白质复合物的变化;并且以不同海拔生长的珠芽蓼为研究对象,分析其叶黄素循环能力,研究蛋白质复合物的组成.主要研究结果如下:1.蓝绿温和胶可以同时在一块胶上将光系统Ⅰ、光系统Ⅱ、细胞色素b6f复合物、捕光复合物Ⅱ、ATP合酶和Rubisco分开,对基质和基粒类囊体膜进行了色素蛋白复合物组成分析,发现基质类囊体中主要存在PS Ⅰ.2.利用SDS-脲-聚丙烯酰胺凝胶和蓝绿温和胶电泳,结合免疫印记分析质体膜蛋白复合物发现:未照光的大麦黄化体中,只含有Rubisco;光照4h后出现分子量为450 kDa的PS Ⅰ;光照6h时,出现了少量LHCⅡ;光照8h时,分子量为230 kDa的CP43缺失的PSⅡ蛋白复合先出现;光照12h时,含有CP47、CP43、D2和D1等蛋白质的分子量为260 kDa的完整PS Ⅱ蛋白复合物出现.光照24h后,质体膜蛋白与正常条件下生长的大麦类囊体膜蛋白组成一致;可见光区圆二性色谱图说明随着光照时间的增长,LHCⅡ特征峰在8h出现.超微结构分析发现未照光的大麦黄化体中,含有大量类结晶前片层体.光照12h时,类结晶前片层体消失,原类囊体占主导地位,还有少数类囊体垛叠片层.光照24h的大麦类囊体则排列整齐,基粒发达.各个光照时期的质体直径无明显差异.3.不同海拔珠芽蓼叶绿素总含量及叶绿素b含量随海拔升高而减小,类胡萝卜素含量随海拔的升高而略有增加,同时类胡萝卜素/叶绿素比值随海拔的升高而增大;随着海拔高度的增加,叶黄素循环类胡萝卜素总含量(VAZ)逐渐升高;玉米黄质及紫黄质(V+Z)含量也逐渐升高;蓝绿温和胶电泳分析发现海拔2200m处的珠芽蓼中PS H主要以三种形式存在:单体、二聚体和超级复合体.而3900 m处的珠芽蓼中主要以PSⅡ单体和部分解离的两种形式存在.不同海拔珠芽蓼中PS Ⅱ的聚合形式有所不同.
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