顺铂对卵巢癌细胞系Ho-8910中BMi-1、P16INK4A的表达影响

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目的:  研究顺铂对卵巢癌细胞HO-8910中BMI-1、P16INK4A的表达影响,初步分析这两种基因与顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡的关系。  方法:  1.培养对数生长期人卵巢癌细胞株HO-8910,加入不同浓度梯度的顺铂,分别干预24h、48h、72h后采用MTT法检测细胞的抑制率。  2.培养对数生长期人卵巢癌细胞株HO-8910,加入不同浓度的顺铂,干预48h后采用TUNEL染色法检测细胞凋亡情况。  3.培养对数生长期人卵巢癌细胞株HO-8910,加入一定浓度的顺铂,干预48h后采用Western blotting技术检测细胞中BMI-1、P16INK4A蛋白的相对表达量。  4.培养对数生长期人卵巢癌细胞株HO-8910,加入一定浓度的顺铂,干预48h后采用Real-time PCR技术检测细胞中BMI-1mRNA、P16INK4A mRNA的相对表达量。  结果:  1.在顺铂浓度为0.3125ug/ml~10ug/ml的范围内能够抑制卵巢癌细胞HO-8910增殖,其抑制作用随着药物浓度的增加及时间的延长而增强(P<0.05)。  2.TUNEL试验证实顺铂能够诱导卵巢癌细胞HO-8910凋亡,凋亡阳性信号随药物浓度的增加而增强,提示凋亡细胞数目随顺铂浓度的增加而增加。  3.顺铂处理卵巢癌细胞HO-8910细胞48h后,BMI-1蛋白相对表达量及P16INK4A蛋白相对表达量均降低,与对照组相比P<0.05,差异有统计学意义。  4.顺铂干预卵巢癌细胞HO-8910细胞48h后,BMI-1 mRNA相对表达量及P16INK4A mRNA相对表达量均降低,与对照组相比P<0.05,差异有统计学意义。  结论:  1、在一定浓度范围内,顺铂能够抑制卵巢癌细胞HO-8910增殖并能诱导其凋亡,其抑制作用具有浓度和时间依赖性。  2、BMI-1、P16 INK4A在顺铂诱导的卵巢癌细胞HO-8910凋亡中表达下调,提示这两种基因可能参了卵巢癌细胞凋亡过程,其调控机制尚需进一步研究。
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