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目的1.对某院异基因造血干细胞移植（Allo-HSCT）患者环孢素A（CsA）血药浓度结果进行回顾性分析,探究CsA血药浓度与术后时间、性别、年龄以及安全性和疗效的关系。2.建立高效液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）同时测定全血中CsA和伏立康唑（VRZ）血药浓度,旨在对CsA和VRZ同时进行治疗药物监测（TDM）,分析两者间的相互作用,为临床个体化、精准化给药提供依据。方法1.收集2012年6月2018年6月101例某院Allo-HSCT术后使用CsA患者的病历资料,详细记录患者基本信息、临床诊断、CsA给药剂量、CsA血药浓度结果、生化检查结果及术后存活时间等相关信息。利用SPSS20.0软件统计分析CsA血药浓度与术后时间、性别、年龄及安全性与疗效的关系。2.样品前处理采用液-液萃取的方法;色谱柱用Agilent C18（4.6 mm×75 mm,3.5μm）;流动相由甲醇-水（85︰15）组成,柱温50℃,等度洗脱;流速0.5 mL·min-1,运行10 min。质谱采用多反应监测,定量离子对为CsA:m/z 1224.8→1112.7,FK520（IS1）:m/z 814.5→604.1;VRZ:m/z 350.2→281.1,FLC（IS2）:m/z 307.0→238.0。分别采用LC-MS/MS法、酶放大免疫分析法（EMIT）、荧光偏振免疫分析法（FPIA）测定30人份CsA血药浓度,使用SPSS 20.0软件对LC-MS/MS法与EMIT法和FPIA法检测结果进行相关性和一致性评价。3.进行一项自身前后对照研究,根据纳入排除标准,收集2019年1月2019年12月在某院干细胞移植中心进行Allo-HSCT的患者,测定VRZ给药前和给药后的CsA与VRZ的稳态血药浓度,使用SPSS 20.0软件对VRZ给药前后CsA的C/D比值以及VRZ浓度对CsA的C/D比值增加的影响进行统计分析。结果1.本研究共收集101例Allo-HSCT患者,其中男性患者64名,女性患者37名,累计测定CsA血药浓度696例/次,分布在治疗浓度150400 ng·mL-1范围内的299例/次,占42.96%;101例患者中,平均血药浓度在治疗范围150400 ng·mL-1内的有74例,占73.27%。术后时间、性别、年龄均对CsA血药浓度有一定的影响,CsA血药浓度<200 ng·mL-1时,急性移植物抗宿主病（aGVHD）发生率为62.50%,>200 ng·mL-1时,aGVHD发生率为37.70%,CsA血药浓度>400 ng·mL-1时,肾损伤发生率为70.00%,肝损伤发生率为60.00%。2.建立的LC-MS/MS同时测定CsA和VRZ血药浓度的方法,其线性范围和定量限均符合测定要求,回收率均在80%120%,日间、日内精密度<15%。3种方法测定30例患者CsA血药浓度结果分别为:LC-MS/MS法为103.49±47.24 ng·mL-1,EMIT法为132.04±59.73 ng·mL-1,FPIA法为148.94±72.48 ng·mL-1。配对t检验显示LC-MS/MS法测定值显著低于EMIT法及FPIA法（P<0.05）,但Pearson分析显示LC-MS/MS法与EMIT法及FPIA法测定结果趋势间具有显著相关性（r=0.908,0.923）,Bland-Altman图显示,LC-MS/MS法与EMIT法测定结果偏差会小一些,一致性更好。3.在2019年1月2019年12月期间共收集Allo-HSCT患者15例,其使用VRZ57 d后,CsA的C/D比值中位数为123.50（45.88,178.24）(ng·mL-1)/（mg/kg）,给VRZ前的中位数为64.14（25.35,112.36）(ng·mL-1)/（mg/kg）,Wilcoxon符号秩和检验有显著性差异（P<0.001）。VRZ血药浓度的中位数为1.74（0.48,3.70）μg·mL-1,CsA的C/D比值增加中位数为82.61%（8.00%,190.00%）,Spearman分析表明无显著相关性（ρ=-0.273,P=0.32）。结论1.在长期治疗中,不同个体对CsA的敏感性和耐受性差异较大,其血药浓度受到术后时间、性别、年龄等多种因素的影响。当CsA血药浓度<200 ng·mL-1时,aGVHD发生率高;当CsA血药浓度>400 ng·mL-1时,肝肾不良反应的发生率增高。建议CsA血药浓度安全有效范围调整为200400 ng·mL-1。2.本实验建立的LC-MS/MS方法可以用于同时测定全血中CsA和VRZ血药浓度,方法快速、灵敏、专属性强且重现性好。对比发现,LC-MS/MS法与传统免疫分析法（EMIT法、FPIA法）测定的CsA血药浓度结果间线性关系良好,但免疫分析法（EMIT法、FPIA法）测定结果显著高于LC-MS/MS法。进一步统计分析表明LC-MS/MS法与EMIT法结果一致性更佳,两种方法之间具有相互替代性。3.CsA与VRZ之间存在明显的药物相互作用（DDI）,VRZ使CsA血药浓度显著性升高,但VRZ血药浓度与CsA血药浓度升高幅度无显著相关,说明VRZ与CsA之间的DDI程度大小存在个体差异。为了能够更好地保障Allo-HSCT患者联合使用CsA和VRZ的有效性和安全性,采用LC-MS/MS法同时快速监测两者血药浓度并做精细化调整尤为重要。