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目的筛选人卵巢癌定向淋巴道高转移恶性肿瘤细胞亚群,并对其生物学特性进行鉴定和转移相关基因差异表达的研究。方法将卵巢癌细胞株SKOV3细胞种植于裸鼠爪垫下,待植入物在裸鼠体内成瘤并发生转移时,取其淋巴结转移灶癌细胞再次种植于裸鼠爪垫下传代,每代均取出淋巴结转移灶瘤组织进行细胞培养,通过单细胞分离(克隆)培养或局部淋巴结转移灶筛选的方法建立连续传代细胞系,重复传3代后,通过裸鼠接种实验观察各代裸鼠的淋巴结转移率。利用细胞生长曲线测定、HE染色、染色体分析、流式细胞仪、裸鼠接种、免疫组化等方法鉴定各代细胞的生物学特性。基因芯片技术研究各代转移的细胞与原代细胞进行与转移相关基因的差异表达。结果所建立的连续传代细胞系,分别命名为SKOV3-PM1,SKOV3-PM2和SKOV3-PM3细胞,癌细胞在裸鼠体内传3代后,裸鼠的淋巴结转移率为100%(10/10),形成淋巴结转移灶的数目较母系为多,母系转移率10%(1/10),统计学分析P＜0.05,有显著差异。且淋巴结转移途径较为单一;细胞染色体分析显示原代SKOV3细胞染色体数目众数为83～89条,SKOV3-PM3染色体众数91～105条,并保持着卵巢上皮癌细胞生物学特性;SKOV3-PM3细胞倍增时间为22.7 h,原代SKOV3细胞为49.9 h,前者的生长速度明显快于后者。流式细胞分析显示,SKOV3-PM细胞DNA合成期和分裂期细胞的比例高于母株SKOV3细胞。本研究在96个人类已知与肿瘤转移有关基因的筛选中发现60个表达差异性基因,将SKOV3-PM2、SKOV3-PM3与SKOV3比较均有上调的基因31个,一个共同下调。结论本研究成功建立了人卵巢癌淋巴道定向高转移的细胞模型,为研究卵巢癌的淋巴结浸润转移的发病机制提供了良好的实验材料。筛选出了与定向高淋巴结转移相关的差异基因。