车前子多糖的分离纯化、结构分析及生物活性研究

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车前子(Plantago asiatic L.)为车前科(Plantaginaceae)车前属(Plantago L.)植物的干燥成熟种子,本课题通过热碱提取,乙醇醇沉的方法获得车前子粗多糖。再经DEAE阴离子交换树脂和SephacrylTM S-400葡聚糖凝胶树脂分离后,冷冻干燥得到车前子精制多糖PLP。通过HPLC法测定PLP纯度为99.2%,分子量为1.15×106Da。采用乙酰化和PMP柱前衍生化两种方法分析PLP的单糖组成为木糖:阿拉伯糖:葡萄糖醛酸:半乳糖=18.8:7.2:6.1:1。通过甲基化-气质联用分析、傅里叶红外光谱分析以及一维和二维核磁共振分析对PLP的结构进行了进一步解析。结果显示,PLP是一种高分支度的杂木聚多糖,主链为β-1,4-Xylp,每八个β-1,4-Xylp单元,有三个α-GlcAp-(1→3)-Araf分支链接在2号位上,有一个α-T-GlcAp和一个α-Araf-(1→5)-Araf连接在3号位上。体外抗氧化活性实验表明车前子多糖对DPPH自由基、氧自由基和羟自由基均具有一定的清除能力。同时还发现,车前子多糖对COX-2、IL-1β和IL-6三种炎症因子的表达均有抑制作用,其中对IL-1β的抑制作用最强,该抗炎作用尚属首次报道。在上述活性实验中,同时开展了车前子多糖的胆酸结合能力分析,结果表明,PLP能有效结合胆汁酸和鹅去氧胆酸,促进脂类消化吸收,具有潜在的降低胆固醇的作用。该研究表明车前子多糖具有延缓因氧化而引起的机体衰老、缓解慢性炎症和降低胆固醇水平潜在功效,为车前子用于开发功能性食品和食品强化剂提供了理论依据。
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