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目的:
比较温和灸、无烟温和灸、艾烟3种不同方法对肠易激综合征(IrritableBowelSyndrome,IBS)模型大鼠的干预效应,以及对IBS模型大鼠结肠水通道蛋白-3(Aquaporin-3,AQP3)、水通道蛋白-8(Aquaporin-8,AQP8)、紧密连接蛋白-1(Claudin-1)及钠钾ATP酶(Na+/K+-ATPase)表达的影响,从水液代谢角度探讨艾灸及其生成物治疗IBS模型大鼠的作用机制。
方法:
8天龄雄性Sprague-Dawley(SD)乳鼠44只,随机分为正常对照组10只,造模组34只,采用Al-Chaer方法,建立IBS大鼠模型。第6周正常对照组、造模组大鼠各取2只大鼠进行模型鉴定,模型鉴定成功后,余32只造模大鼠随机分为:温和灸组、无烟温和灸组、艾烟组、模型组。干预1周后,观察各组大鼠一般情况、腹壁收缩反射(AbdominalwithdrawreflexAWR)评分,HE染色光镜下观察各组大鼠结肠组织形态结构,EnVision免疫组织化学法检测各组大鼠结肠AQP3、AQP8、Claudin-1、Na+/K-ATPase表达。
结果:
1)正常对照组大鼠食欲正常、反应敏捷,大便软硬适中,皮毛光亮柔顺。模型组大鼠体型偏小,饮食欠佳、易激惹,大便稀溏,皮毛欠光泽,部分沾有稀便。干预后,大鼠体重增加,食欲改善、反应灵敏,大便稀溏情况逐步改善,皮毛有光泽。
2)与正常组比较,模型组大鼠结肠20mmHg、40mmHg、60mmHg、80mmHgCRD时AWR评分均显著升高(P<0.01),有统计学差异;与模型组比较,温和灸组20mmHg、40mmHg、60mmHg、80mmHgCRD时AWR评分均显著降低(P<0.01),无烟温和灸组20mmHg、40mmHgCRD时AWR评分均显著降低(P<0.01,P<0.05),艾烟组20mmHgCRD时AWR评分均降低(P<0.05)。
3)20mmHgCRD时AWR评分,温和灸组与艾烟组比较有统计学差异(P<0.01),温和灸组与无烟温和灸组比较、无烟温和灸组与艾烟组比较无统计学差异(P>0.05)。
4)40mmHgCRD时AWR评分,温和灸组与无烟温和灸组比较无统计学差异(P>0.05)。
5)与正常组比较,模型组大鼠结肠AQP3、AQP8、Claudin-1、钠钾ATP酶表达显著降低(P<0.01),有统计学差异;与模型组比较,温和灸组大鼠结肠AQP3、AQP8、Claudin-1表达显著升高(P<0.01,P<0.05),无烟温和灸组大鼠结肠AQP3、Claudin-1表达升高(P<0.05),艾烟组大鼠结肠AQP3、Claudin-1表达升高(P<0.05,P<0.01)。
6)大鼠结肠APQ3表达,温和灸组、无烟温和灸组、艾烟组两两组间比较,无统计学差异(P>0.05)。
7)大鼠结肠Claudin-1表达,温和灸组与艾烟组比较有统计学差异(P<0.05),温和灸组与无烟温和灸组比较、无烟温和灸与艾烟组比较,无统计学差异(P>0.05)。
结论:
1)艾灸及其生成物均能不同程度降低IBS大鼠AWR评分,改善内脏痛敏,其中,温和灸的作用优于无烟温和灸、艾烟;无烟温和灸优于艾烟。
2)温和灸能够显著升高IBS大鼠结肠异常降低的AQP3、AQP8、Claudin-1表达,调节肠道水液代谢,改善IBS内脏痛敏,发挥治疗作用。
3)无烟温和灸能够改善IBS大鼠结肠异常降低的AQP3、Claudin-1表达,艾烟能够改善IBS大鼠结肠异常降低的AQP3、Claudin-1表达,但均对结肠AQP8无显著调节作用,提示无烟温和灸、艾烟仅能在一定程度上调节肠道水液代谢,改善IBS内脏痛敏。
4)温和灸对IBS大鼠结肠AQP8的调节作用优于无烟温和灸、艾烟,以及温和灸对IBS大鼠结肠Claudin-1的调节作用优于艾烟,该作用可能是温和灸对IBS大鼠的干预效应优于无烟温和灸、艾烟的重要机制。