黄芪总黄酮对氧化损伤小鼠胚胎凋亡相关基因表达的影响

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黄芪是一种已经用了两千多年的中药,可以增强机体的免疫能力、抗衰老、抗应激、保肝、利尿、有较广泛的抗菌作用。而黄芪总黄酮(TFA)则是黄芪的主要成分。在之前的研究中已经知道黄芪总黄酮可以清除人体内的自由基、保护心脑血管、抗癌、抗菌的作用并且降低小鼠早期胚胎内的ROS水平。本实验在之前的研究上继续研究TFA在细胞和基因层面上对昆明小鼠早期胚胎体外发育的影响,TFA对体外培养小鼠囊胚的ROS水平、GSH(谷胱甘肽)水平、和对细胞凋亡相关基因的表达的影响。本试验采取了之前研究中TFA的最适浓度为75 mg/L,将实验分为三组对照组(C组)、H2O2处理组(H组)、H2O2+最适浓度TFA组(TH组)。进行了囊胚形态比较,三组发育率的比较,通过DCFH-DA荧光染色测定三组小鼠囊胚的ROS水平、GSH水平、线粒体膜电位水平(JC-1),利用RTq-PCR测定Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Bax、Bcl-2、FAS、FASL、Cy-c 基因的表达量。结果显示:1、在TFA对胚胎的发育率的影响中,TH组与C组在2细胞与4细胞时期的发育率没有明显差异而显著高于H组(p<0.05),而在囊胚期TH组显著低于C组(p<0.05)且显著高于H组(p<0.05);2、在TFA对胚胎ROS水平的影响中,TH组与C组无显著差异且显著低于H 组(p<0.05);3、在TFA对胚胎GSH水平的影响中,TH组与C组无显著差异且显著高于H 组(p<0.05);4、在TFA对胚胎JC-1水平的影响中,TH组显著高于H组且显著低于C组(p<0.05);5、在TFA对小鼠囊胚相关抗氧化酶基因的影响中,Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9基因的表达量TH组与C组无显著差异且显著低于H组(p<0.01),Bcl-2/Bax基因的表达量TH组显著低于H组且显著高于C组(p<0.01),Cy-c的基因表达量TH组与C组无显著差异且显著低于H组(p<0.01),FAS/FASL基因的表达量TH组与C组无显著差异且显著低于H组(p<0.01)。综上述结果显示,黄芪总黄酮可以降低氧化损伤小鼠早期胚胎的ROS的水平而增高了 GSH和线粒体膜电位的水平,在基因层面调节了凋亡相关基因的表达。从而保护了胚胎细胞,降低了氧化损伤。
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