【摘 要】
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目的 已有研究提示人类染色体8p的缺失与肝癌的转移侵袭有关。我们前期运用微细胞介导的染色体转移方法(MMCT)将人类完整的8号染色体导入高转移大鼠肝癌细胞系C5F中可抑制
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目的 已有研究提示人类染色体8p的缺失与肝癌的转移侵袭有关。我们前期运用微细胞介导的染色体转移方法(MMCT)将人类完整的8号染色体导入高转移大鼠肝癌细胞系C5F中可抑制转移灶的形成。在此基础上运用序列标签位点(STS)为路标,用基因组物理图谱的方法分析人类染色体8p上肝癌转移抑制基因相关染色体缺失状况,为进一步寻找克隆可能的肝癌转移抑制基因奠定基础。 方法 从NCBI的UniSTS数掘库查询STS的引物序列,以大鼠肝癌高转移系C5F为阴性对照,染色体供体细胞A9 (neo8)为阳性对照,微细胞杂交克隆DNA为模板(A9/C5F-1 A9/C5F-2为转移不抑制组,A9/C5F-4 A9/C5F-8 A9/C5F-10为转移抑制组)进行STS-PCR,扩增产物经2%琼脂糖凝胶电泳分析,对结果进行验证。 结果 通过两次人类8号染色体短臂STS位点的筛选,在人类染色体8p上从D8S542位点起至D8S1973位点区段(位于染色体8p21.1-23.1位置),约18cM,D8S542(10194919-10195159),D8S552(12786562-12786681),D8S1733(22576582-22576836),D8S1734 (22851217-22851336),D8S254(16652480-16652550)及D8S1973 (28681110-28681363)等STS位点所在区域在转移抑制组杂交克隆(A9/C5F-4 A9/C5F-8 A9/C5F-10)存在STS位点的不同程度的获得和转移不抑制组杂交克隆组(A9/C5F-1 A9/C5F-2)STS位点的缺失。提示这些位点所在区域可能存在与肝癌转移相关的抑制基因。 结论 初步推测D8S254-D8S1973所在的人类染色体8p21.1-23.1位置存在可能的肝癌转移抑制基因。
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