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铁棍山药(Dioscorea opposita Thunb. cv. Tiegun)是我国特有的一个山药种质资源,是怀山药中一个优良的品种。它具有增强人体免疫力、降糖降脂、抗衰老等功能。传统的繁殖方法和途径繁殖速度慢,为了解决这个问题,本课题对铁棍山药类原球茎繁殖这一新途径进行了系统的研究,探讨了其诱导形成、继代增殖、植株再生过程中的关键技术,并对其形态发生发育的阶段进行了划分。结果如下:1.带腋芽茎段是诱导铁棍山药类原球茎的适宜外植体,诱导的适宜培养基为MS+TDZ1.0mg/L+蔗糖30g/L。诱导类原球茎外植体类型的选择上,与带节点茎段、不带节茎段、叶片相比,带腋芽茎段诱导出的类原球茎数量较多,整齐度高。适宜浓度的TDZ是诱导类原球茎的关键,TDZ1.0mg/L时诱导效果最好。蔗糖、葡萄糖、果糖和甘露醇四种碳源中,蔗糖是诱导类原球茎的适宜碳源。2.铁棍山药类原球茎继代增殖的适宜培养基为MS+6-BA9mg/L+Vc50mg/L+葡萄糖30g/L,适宜培养方式为固体静置光照培养。适宜浓度的6-BA对类原球茎的继代增殖效果较好,浓度为9mg/L;增殖适宜的碳源为葡萄糖,浓度为30g/L;降低MS培养基中无机盐的含量不利于类原球茎的增殖;通过添加KT、NAA、2,4-D与Vc的正交试验,发现继代增殖培养基中只添加50mg/LVc,类原球茎增殖效果最好。3.铁棍山药类原球茎分化成苗及再生植株快繁的适宜培养基为MS+KT2mg/L+NAA0.02mg/L+蔗糖30g/L,再生植株适宜的生根培养基为1/4MS+NAA0.05mg/L+PP3331.0mg/L+蔗糖15g/L,适宜的培养方式均为液体静置光照培养。再生植株在生根培养基上42d后可形成根系发达生长健壮的试管苗,将其移栽入蛭石中进行炼苗,期间适当浇营养液,30d后移栽成活率可达85%。4.铁棍山药类原球茎形态发生发育阶段划分为六个阶段:Ⅰ.外植体时期;Ⅱ.初生类原球茎时期;Ⅲ.次生类原球茎时期;Ⅳ.三生类原球茎类原球茎时期;Ⅴ.类原球茎分化初期;Ⅵ.类原球茎分化后期。本研究建立的铁棍山药类原球茎繁殖技术体系为铁棍山药的规模化生产及推广应用提供了一条新的途径。