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目的:探讨体外骨髓间充质干细胞、神经生长因子及腺苷三磷酸对缺氧-复氧大鼠皮质神经元的保护作用。 方法:体外分离培养Wistar大鼠骨髓间充质干细胞,当细胞培养融合达90%时行无血清培养24h,收集的培养液即为BMMSCs条件培养基。取体外培养8d的Wistar大鼠皮质神经元细胞,随机分为正常对照组、缺氧组、骨髓间充质干细胞条件培养基干预组、NGF干预组和ATP干预组。除正常对照组外,各组缺氧6h后在常氧条件下继续培养24h,用噻唑盐比色法(MTT)、乳酸脱氢酶(LDH)法测定细胞活性的改变,流式细胞术、透射电镜检测不同时间段细胞凋亡的变化。 结果:缺氧组神经元细胞活性较正常对照组明显降低(P<0.001),LDH渗漏量及细胞凋亡率显著增加(P<0.001)。缺氧6h时,B-CM、ATP干预组神经元细胞活性较缺氧组升高(P<0.001),细胞LDH渗漏量减少(P<0.01),细胞凋亡率降低(P<0.01),凋亡细胞减少;缺氧24h时,B-CM、NGF、ATP干预组较缺氧组神经元细胞活性增高(P<0.01),细胞LDH渗漏量减少(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),凋亡细胞减少。与NGF干预组比较,B-CM、ATP的保护作用更为显著(P<0.05)。 结论:缺氧能够降低神经元细胞活性并诱导其凋亡,骨髓间充质干细胞条件培养基、NGF、ATP能够提高缺氧神经元的细胞活性,抑制神经元细胞的凋亡。