利普司他汀是毒三素链霉菌的次级代谢产物,提纯后的氢化物奥利司他为脂肪酶抑制剂,是近十年来减肥药物市场上的主要减肥药物。本论文在本实验室前期研究的基础上,对利普司他汀的提取纯化工艺进行了优化研究,并采用LC/MS技术解谱代谢杂质结构,阐述其生物合成途径。首先对利普司他汀的稳定性进行了研究,结果表明在p H6-7时稳定性较好,强酸或碱性条件下都会破坏其稳定性。同一p H值下,温度越高,时间越长利普司他汀的结构破坏的越严重,稳定性越差。无光条件下不会破坏利普司他汀的空间结构,对其稳定性产生明显的影响,强光有点影响,但影响不大。本文在研究利普司他汀稳定性的基础上,进行了提取工艺优化的研究,依据本实验室前期工艺研究结果,采用乙腈冷冻除油及硅胶层析代替大孔吸附树脂工艺,确定的最佳提取工艺为:80%乙醇超声浸提菌丝体30min,离心收集含有目标产物的上清液,浸提液与正庚烷以3:1的比例在常温下萃取,萃取液真空浓缩,添加3BV乙腈-20℃下冷冻6h-8h,除去下层葵花油及部分杂质,乙腈真空浓缩至干,得到利普司他汀油状粗品。粗品进行硅胶层析,在载样量3%,洗脱流速0.75BV/h,5%、10%、15%丙酮-正庚烷进行梯度洗脱,将非极性及弱极性杂质洗脱下来,收集5BV15%丙酮-正庚烷洗脱液,洗脱液真空浓缩至干,得到利普司他汀,纯度由发酵液的61.8%提高到82.04%。新工艺去掉大孔吸附,废乙醇量仅为原工艺1/3,可大幅降低精馏回收能耗和生产成本,更适合工业生产。本文采用LC/MS检测提取过程中的杂质,基于碎片离子信息,以及亚结构的可能断点位置与利普司他汀结构源的相关程度,确证了8个代谢杂质的结构,其中6个与利普司他汀的断点位置高度重合,并存在相同的亚结构。经过结构确证提取过程中的8个杂质,正是发酵的代谢产物,结合利普司他汀生物合成的文献,本文进一步研究了利普司他汀生物合成的途径。其中3个代谢产物为利普司他汀生物合成的关键途径产物,另3个为代谢衍生物。本文通过LC/MS检测,确证了未知代谢产物的结构,利普司他汀的生物合成途径更加明晰,为代谢工程和基因工程技术进一步改造菌种,提高毒三素链霉菌的生产能力,以及提取过程杂质的分离,提供了理论基础和研究依据。