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目的构建并鉴定牛乳铁蛋白抗菌-乳源免疫调节融合肽（lfcinB-immunostimulating fusion peptide，简称LIFP）基因的重组载体，在大肠杆菌BL21中诱导表达和纯化，获得较高纯度的融合肽；研究LIFP基因体外对卵巢癌细胞SKOV3的影响，为基因治疗卵巢癌提供基础。方法以Genbank报道的牛乳铁蛋白抗菌肽（LfcinB）与乳源免疫调节肽（PGPIPN）的序列为参照，以连接臂GGGGS连接两种肽，合成融合肽LIFP基因，并在其5’端加入凝血酶FXa识别的酶切位点。将LIFP基因构建到表达载体pGEX-KG中，PCR筛选阳性克隆，测序鉴定后，采用最优表达条件诱导重组载体在大肠杆菌BL21中表达，超声裂菌后， SDS-PAGE和Western-blot鉴定融合蛋白（LIFP-GST），通过AKTA层析系统纯化融合蛋白，FXa酶切后，高效液相色谱（HPLC）、质谱(MS)鉴定LIFP的表达；将LIFP基因构建到pLJM1载体[含CMV启动子和绿色荧光蛋白（GFP）中，获得pLJM1-LIFP慢病毒表达载体，经PCR检测及测序鉴定后，与慢病毒包装质粒通过Lipofeetamine2000共转染至包装细胞293T，包装产生病毒液，并测定其滴度；体外培养人卵巢癌细胞SKOV3，重组慢病毒感染细胞后，MTT法观察融合肽对SKOV3细胞的生长抑制作用， Hoechst33258染色观察细胞核形态的变化。结果PCR和测序证实成功构建了pGEX-kg-LIFP重组载体；Western-blot结果显示成功诱导LIFP的高表达； HPLC显示获得较高纯度LIFP；MS显示氨基酸序列与目的肽一致；成功构建pLJM1-LIFP慢病毒表达载体，三质粒共转染293T细胞后，荧光显微镜下可见大量绿色荧光。包装慢病毒产生病毒悬液的滴度为1.2×10~8TU/ML；重组病毒感染SKOV3细胞后，MTT结果显示融合肽对体外培养的SKOV3细胞生长具有抑制作用(P<0.05)，荧光显微镜观察到凋亡细胞典型的形态学特征。结论成功诱导表达纯化融合肽，并初步证实对体外SKOV3有生长抑制和诱导细胞凋亡作用。