银杏内酯B和鹿茸多肽对胆碱能前体细胞发生分化的研究

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阿尔茨海默病(AD)作为一种主要影响患者认知功能的慢性进行性中枢神经系统变性疾病,是一种老年人常见的疾病类型,其发生和发展可能严重影响患者及其家人的生活质量。神经系统变性疾病的病因及病理改变复杂多样,多由各种原因导致相关的神经元变性、神经细胞数量减少等所致。对于此类神经系统变性疾病目前仍无有效的治疗方法,虽有很多的药物可选择,但多只是在某种程度上延缓或改善症状,不能逆转病情的进展,不能补充中枢神经系统大量丢失的神经细胞。因此,如何在预防或修复神经元损伤的基础上,补充新生神经元会是一个新的探索方向。近年来有许多研究者致力于神经干细胞(NSCs)及神经营养因子的研究,已经证实了中枢神经细胞的可再生性,故NSCs再生治疗用于修复中枢神经系统损伤、治疗中枢神经系统退行性疾病已成为当今的研究热点之一。许多研究报道称NSCs移植治疗神经系统变性疾病模型动物有效,然而用NSCs新生神经元替代缺损变性的神经细胞首先要诱导NSCs分化为有效的神经元。本实验采用中药制剂银杏内酯B、鹿茸多肽分别及联合作用于体外培养的E14胎鼠端脑细胞,研究它们对神经干细胞的分裂、增殖及其对胆碱能前体细胞发生分化的影响,希望为NSCs的体外培养、诱导分化提供一定的研究方向,为神经系统退行性疾病的治疗探索和寻求新策略。原代培养E14胎鼠端脑细胞,分别在实验组培养液中加入银杏内酯B、鹿茸多肽及二者联合,细胞培养4d后进行乙酰胆碱转移酶(ChAT)、5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)免疫细胞化学染色后计算二者免疫反应阳性细胞数。实验研究发现:细胞培养形态学观察课件银杏内酯B、鹿茸多肽及联合实验组与对照组相比,神经球较大,突起多而粗,且神经球周围细胞迁移数量多。免疫细胞化学实验可见ChAT免疫反应阳性细胞多分布于神经球边缘,球间可见散在阳性单细胞分布。实验组ChAT免疫反应阳性细胞数量较对照组有显著性增加,以联合用药组增加最为显著,其次为鹿茸多肽组;BrdU免疫反应阳性细胞数量与对照组相比,鹿茸多肽组增加最为明显。由上得出结论,银杏内酯B、鹿茸多肽均可促进端脑胆碱能前体细胞发生和分化,联合用药作用更为显著;鹿茸多肽对神经干细胞的增殖有明显促进作用。
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