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用全细胞膜片钳技术,从通道电流及动作电位方面分析了溴虫腈(chlorfenapyr)对急性分离的甜菜夜蛾(Laphygma exigua)幼虫中枢神经细胞电压门控钠通道功能的影响。
在外液中施加浓度为10-5、10-7和10-9 mol/L的溴虫腈。结果表明:
10-5mol/L作用10min左右,激活电压向正电位方向移动约10 mV,通道在-30 mV左右激活,电流幅值逐渐变小,30min时仅为初始电流的68.5%6.6%;加药前后激活曲线的V1/2act分别是(-27.77±1.35)mV和(-21.72±1.08)mV、k分别是(2.113±0.687)和(2.6145±0.414);失活曲线左移,给药前后V1/2inact分别是(-43.94±1.13)mV和(-62.06±1.69)mV、k分别为(7.5725±0.543)和(13.151±1.23)。
10-7mol/L作用20min左右,激活电压向正电位方向移动约10 mV,通道在-30 mV左右激活,电流幅值逐渐变小,30min时为初始电流的72.2%±7.1%;加药前后激活曲线的V1/2act分别是(-27.77±1.35)mV和(-24.05±1.25)mV、k分别是(2.113±0.687)和(2.8546±0.532);加药前后失活曲线的V1/2inact分别是(-43.94±1.13)mV和(-54.51±1.54)mV,k分别为(7.5725±0.543)和(11.174±0.709)。
10-9mol/L记录的30min内,激活电压未发生移动,但电流幅值逐渐变小,30min时为初始电流的80.3%±7.7%;加药前后激活曲线的V1/2act分别是(-27.77±1.35)mV和(-26.17±1.71)mV变化不明显、k分别是(2.113±0.687)和(2.3583±0.489);失活曲线给药前后V1/2inaet分别是(-43.94±1.13)mV和(-48.34±1.13)mV;k分别为(7.5725±0.543)和(7.7784±0.476)。
溴虫腈对动作电位的影响。10-5、10-7和10-9mol/L的溴虫腈作用1min后动作电位幅值分别为97.76±4.10mV、96.76±0.94mV和92.67±1.65mV;3min分别为94.09±5.17mV、91.79±4.65mV和84.64±6.15mV;5min分别为88.54±3.12mV、84.57±1.78mV和76.84±1.14mV;10min后分别为81.67±5.99mV、75.82±1.58和66.64±1.36。作用结果表明,溴虫腈能降低动作电位的幅度,并能使动作电位的时程随着药物作用时间的延长而增加。
这说明溴虫腈能抑制甜菜夜蛾幼虫中枢神经元的兴奋性。使电压门控钠通道电流密度和通道功能发生改变。溴虫腈作用后,对甜菜夜蛾神经细胞钠电流峰值影响显著,通道不容易激活,促进了通道失活。说明甜菜夜蛾中枢神经细胞钠通道是溴虫腈药物的作用靶标之一。药物浓度不同对神经元钠电流影响不同,高浓度药物既能减小钠电流峰值又能使峰值电压左移,低浓度药物只能减小峰值电流。药物作用的主要方式是对钠电流峰值的抑制作用。