扣囊复膜酵母高产突变株转化可溶性淀粉生产海藻糖的研究

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该论文中经过化学诱变剂EMS(ethyl methane sulfonate)的诱变作用得到突变株Saccharomycopsis fibuligera All.该突变株在海藻糖为唯一碳源的培养基中生长缓慢,但在其它碳源的培养基中生长正常.经过分析发现突变株All细胞内的中性海藻糖酶和酸性海藻糖酶的活力比野生型有了显著的下降,这就降低了发酵过程中海藻糖酶对细胞内海藻糖的降解作用,从而很大地提高了突变株细胞内的海藻糖积累量.该论文通过突变株All和野生型的2L的发酵罐试验,发现在YPS培养基中经过48小时的发酵,突变株细胞内积累了比野生型多27﹪的海藻糖.同时还比较了发酵过程中这两种菌株培养基内的总糖,还原糖,溶氧等的变化曲线.该论文中通过一系列的摇瓶发酵实验研究了All积累海藻糖的最佳条件.这些条件包括培养基的pH、培养温度、通气量、培养基中NaCl的浓度、培养基中的碳源浓度等.该论文对这些因素做了比较全面的研究和分析,得出All积累海藻糖的最佳条件是:培养基初始pH5.5,培养温度30℃,培养转速200rpm,300ml三角瓶装液量50ml,培养基的NaCl含量在0.4﹪(w/v)左右.在不影响菌体生长的条件下,低碳源浓度有利于菌体内海藻糖的积累.在海藻糖的提取方法上,该论文主要研究了用热蒸馏水和热碳酸钠溶液提取菌体中的海藻糖.试验发现蒸馏水比碳酸钠溶液更适合于海藻糖的工业化生产,提取液经过进一步分离纯化,得到的海藻糖晶体经过高压液相色谱的检验与Sigma公司的海藻糖标准品一致,具有很高的纯度.
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