【摘 要】
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目的:以新型冠状病毒疾病中的细胞因子风暴引起的皮肤病变和肺部损伤作为病理模型,研究沙苑子苷对它们的保护作用及其抗炎抗氧化活性和作用机制。为在天然产物中寻找有效成分治疗新型冠状病毒疾病提供新的实验模型和方法,为沙苑子苷抗炎抗氧化活性的机制研究和以后相似药物的研究提供科学依据和实验研究基础。方法:用MTT实验法和台盼蓝拒染法探究细胞存活率的变化;用ELISA检测试剂盒检测CCL17、CCL22和IL-
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目的:以新型冠状病毒疾病中的细胞因子风暴引起的皮肤病变和肺部损伤作为病理模型,研究沙苑子苷对它们的保护作用及其抗炎抗氧化活性和作用机制。为在天然产物中寻找有效成分治疗新型冠状病毒疾病提供新的实验模型和方法,为沙苑子苷抗炎抗氧化活性的机制研究和以后相似药物的研究提供科学依据和实验研究基础。方法:用MTT实验法和台盼蓝拒染法探究细胞存活率的变化;用ELISA检测试剂盒检测CCL17、CCL22和IL-1β含量的变化;用Caspase-1（活性）染色试剂盒和Caspase-1测定试剂盒（荧光测定法）测定caspase-1的活化水平;用活性氧检测试剂盒和ROS ELISA检测试剂盒检测沙苑子苷作用前后ROS水平的变化;采用Western Blotting实验研究沙苑子苷对细胞因子组合诱导i NOS、COX-2、NLRP3、p-AKT和p-JNK信号通路的影响,NLRP3蛋白的变化也可用免疫荧光实验检测。结果:（1）沙苑子苷对IL-6、TNF-α和IFN-γ联合作用诱导的细胞损伤具有一定的保护作用,20μM的沙苑子苷可提高约27.98%的细胞存活率,并可以通过降低CCL17、CCL22、ROS、IL-1β的含量和caspase-1的活化水平发挥抗炎抗氧化作用,Western Blotting实验结果表明沙苑子苷可以通过抑制i NOS、COX-2、p-JNK、NLRP3、ASC和c-GSDMD蛋白的异常表达发挥抗炎抗氧化作用。（2）沙苑子苷对TNF-α、IL-6、IL-1β和H2O2诱导的Ha Ca T细胞产生的炎性增生现象有一定的抑制作用,20μM沙苑子苷的抑制作用可达约46.43%,对新型冠状病毒疾病中的皮肤损伤具有一定的保护作用,可以降低CCL17、CCL22、ROS在细胞中的含量,抑制i NOS、COX-2、p-JNK、p-AKT、NLRP3、ASC和c-GSDMD蛋白的异常表达,从而发挥抗炎抗氧化的作用。（3）沙苑子苷对IL-6、TNF-α和IFN-γ诱导肺细胞损伤有一定的保护作用,20μM的沙苑子苷可提高约15.70%的细胞存活率,并可以通过抑制细胞因子联合作用于人正常肺上皮细胞（BEAS-2B）细胞使细胞中异常升高的IL-1β的含量和caspase-1的活化水平,免疫荧光实验表明沙苑子苷可以通过抑制细胞因子组合诱导产生的NLRP3蛋白的表达发挥抗炎作用。结论:沙苑子苷对细胞因子风暴引起的皮肤病变和肺部损伤具有一定的保护作用,沙苑子苷具有一定的抗炎抗氧化作用,本研究结果证明沙苑子苷具有抗炎抗氧化作用,或有可能成为有效缓解细胞因子风暴引起损伤的药物。
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