酸枣仁、远志催眠组分制备工艺及药效配伍研究

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本论文以酸枣仁和远志为研究对象,采用现代提取、分离、纯化技术进行有效部位的制备研究,并在此基础上对有效部位及配伍的催眠活性进行评价,以期为酸枣仁和远志的进一步开发利用提供科学依据,具体内容包括以下几个方面。1.远志糖酯提取工艺采用柱串联渗漉提取方法,以DISS(3,6,-二芥子酰基蔗糖)为指标性成分,对远志糖酯的提取工艺进行了研究,优选得到的工艺条件如下:以20-40目远志粉末为原料,以2倍量70%乙醇为浸泡溶剂,浸泡1h,以1 BV/h的流速进行洗脱,收集第1份洗脱液(2倍量)作为终产物,第2份(2倍量)和第3份(2倍量)洗脱液作为下一根提取柱的提取溶剂,以此方法多柱串并联,提取溶剂循环使用。采用该方法,远志药材中DISS的提取率达96.18%,远远高于超声提取方法(73.58%)和热回流提取方法(85.46%)。2.酸枣仁黄酮和皂苷提取工艺采用柱串联渗漉提取方法,以斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B为指标性成分,对酸枣仁黄酮和皂苷的提取工艺进行了研究,优选得到的工艺条件如下:以20-40目酸枣仁粉末为原料,以2.5倍量50%乙醇为浸泡溶剂,浸泡1h,以1BV/h的流速进行洗脱,收集第1份洗脱液(4倍量)作为终产物,第2份(2.5倍量)和第3份(1.5倍量)洗脱液作为下一根提取柱的提取溶剂,以此方法多柱串并联,提取溶剂循环使用。采用该方法实现了酸枣仁有效成分的高效提取,以斯皮诺素、酸枣仁皂苷A和酸枣仁皂苷B为指标的提取率分别为98.93%、97.06%、92.71%,与超声提取方法和热回流提取方法以及传统柱渗漉提取方法相比,展现了其设备要求简单、溶剂用量少、提取效率高与低耗节能的优点。3.酸枣仁黄酮和皂苷分离纯化工艺采用大孔树脂纯化法,筛选出DM130大孔吸附树脂用于酸枣仁黄酮和皂苷的分离纯化,并对树脂纯化工艺进行了研究,优选得到的工艺条件如下:提取液浓缩至生药浓度约1g/mL,以2 BV/h的流速上样5 BV,以2 BV/h的流速水洗8 BV后,用40%乙醇洗脱酸枣仁黄酮,洗脱流速为1 BV/h,洗脱体积为5 BV,再用70%乙醇洗脱酸枣仁皂苷,洗脱流速为1 BV/h,洗脱体积为4 BV。70%乙醇洗脱液减压浓缩干燥即得酸枣仁皂苷有效部位,40%乙醇洗脱液减压旋蒸至干,加入0.2倍生药量水溶解后用等倍量水饱和正丁醇萃取5次,合并萃取液减压浓缩干燥即得酸枣仁黄酮有效部位。此工艺条件下,酸枣仁黄酮有效部位得率0.43%,总黄酮含量59.86%,酸枣仁皂苷有效部位得率0.16%,总皂苷含量60.53%。4.有效部位催眠作用及配伍研究采用均匀设计及最佳子集回归法,通过小鼠阈上剂量戊巴比妥钠协同作用试验,对酸枣仁黄酮、酸枣仁皂苷和远志糖酯三种有效部位及其配伍的催眠作用进行研究。结果显示,酸枣仁黄酮有效部位组、酸枣仁皂苷有效部位组和配伍组睡眠时间分别为45.86min、54.57min和54.14min,与对照组(31.00min)相比有显著性差异,表明各组均具有催眠作用,而酸枣仁黄酮有效部位和皂苷有效部位配伍组与有效部位单用相比,对小鼠睡眠时间的影响并无显著性差异,推断酸枣仁黄酮和酸枣仁皂苷为相加的配伍作用,为酸枣仁用于镇静催眠保健品或者药品的开发提供参考。
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