晾晒烟表面可培养微生物的鉴定及其在烟草加工上的应用

来源 :华南理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Elf_nastia
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我国晾晒烟种类繁多,很多都具有地方性特色,发展中国式卷烟,特别是中式混合型卷烟更是脱离不了地方性晾晒烟原料,但目前我国的晾晒烟原料存在着质量不佳,受天候影响较大的先天性问题,还不能直接用作混合型卷烟的原料,晾晒烟还需经过调制[1]。目前,普遍认为酶和微生物对烟叶发酵过程起到极其重要的作用。本论文中采用传统培养方法结合高通量测序方法,研究了江西“黑老虎”晾晒烟表面微生物群落结构,并从中分离筛选出一些产酶微生物和微生物菌群。另外,将这些产酶能力较强的微生物和菌群添加到一些低等级的烟丝上,以期提高烟丝的吸食性,挖掘这些微生物潜在的工业应用价值。研究结果包含三部分:结合传统培养方法和高通量测序方法,对来自于江西“黑老虎”的四种晾晒烟丝样品表面微生物经过两种培养方式(烟叶汁液体培养基培养和肉汤固体平板培养,简称lc、pc)得到的可培养微生物的16SrDNA进行测序和分析,得到其群落结构。结果表明,经高通量测序分析后,四种样品中微生物经烟叶汁培养丰度多于或持平肉汤培养基培养。“黑老虎”晾晒烟表面主要有3个门类,分别是厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Pr-oteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria),优势门是厚壁菌门和变形菌门。从“黑老虎”晾晒烟烟叶表面分离出一些产酶微生物,筛选到产木聚糖酶、纤维素酶、果胶酶、淀粉酶、蛋白酶的细菌,共得到85株细菌。结果发现,这些细菌具有产木聚糖酶、果胶酶、蛋白酶相对较强的能力,其次是淀粉酶,最后是纤维素酶。其中一些产酶较强的细菌被鉴定为短小芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌。将产酶细菌和菌群制备成微生物制剂,其活菌数达到109-1011cfu/g,仍有相应的产酶能力。这些菌剂回添到低等级的金圣烟叶组和单料烟进行陈化,结合专家评吸进行感官评价和气相色谱-质谱联用仪(GC-MS:Gas Chromatograph-Mass Spectrometer-computer)来分析陈化后产香物质和有刺激性有害物质的变化。结果发现,有些菌剂能够明显提高烟叶的吸食性,感官评价得分提高13.5分,GC-MS结果显示产生产香物质,同时有害物质含量降低。对于挖掘晾晒烟表面微生物资源及其利用提供了重要的依据。
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