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多巴胺(dopamine,DA)是一种儿茶酚胺类递质,参与奖赏机制、学习记忆和情绪过程。在鸣禽脑内DA神经元集中分布在中脑VTA-SNc和PAG中,投射到HVC、RA和X区。多巴胺受体(dopamine receptor,DAR)在X区、RA和HVC中有密集的分布。其中,RA是鸣唱系统中重要的前运动核团之一。是影响鸣唱的最直接作用位点。我们希望通过膜片钳技术,探究DA对RA投射神经元活动的调控机制。我们获得的实验结果包括以下5个方面: 1.通过观察注入去极化和超级化电流神经元所表现出的电位变化,我们将RA神经元分为两类:投射神经元和中间神经元。投射神经元具有稳定自发放,超极化电流可以引起显著的内向整流特点,去极化电流可以诱发产生稳定的电位发放。中间神经元基本无动作电位自发放,注入超级化电流无内向整流特点,去极化电流也可以诱发产生动作电位。 2.DA能够极显著的增加RA投射神经元兴奋性,50μMDA能够使记录细胞诱发AP平均增加37.553%(n=17,p<0.01),洗脱后可以基本恢复正常水平。3.D1样多巴胺受体(D1R)在DA对RA投射神经元兴奋性的调控中起决定性作用。20μMD1R阻断剂sch-23390阻断D1R后,50μMDA将无法显著改变记录细胞的诱发AP发放水平;单独使用10μMD1R激动剂skf-38393特异性激活D1R,能够极显著增加记录细胞诱发AP发放,平均增加23.71%(n=7,p<0.01)。 4.对固有电生理特性的分析表明,DA能够显著改变膜电位(增加11.75%,n=14,p<0.05)、AHP幅度(减小24.55%,n=17,p<0.05)和初始斜坡率(增加69.77%,n=17,p<0.05)。其中,AHP幅度的显著减小与D1R的激活密切相关。而细胞膜电位的显著增加与D2样多巴胺受体(D2R)的激活密切相关。 5.DA对RA投射神经元兴奋性的调节中,D1R和D2R的激活能够通过调节细胞不同的固有生理特性,协调配合增加RA投射神经元的兴奋性。DA的这一作用,将有助于解释鸣禽求偶性鸣唱产生的机制,雌鸟的存在对雄鸟形成一种刺激,这种刺激可以使中脑DA能神经元活动增加,增加RA内DA水平,进而改变RA投射神经元的兴奋性,这将有助于RA更准确地接受HVC和LMAN的信息输入,编码鸣禽的求偶鸣唱。