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目的1.紫杉醇单药作用于骨肉瘤细胞,观察其对骨肉瘤细胞生长凋亡的影响。2.将紫杉醇和咖啡因这两种药物进行联合,观察其对骨肉瘤细胞生长凋亡的影响,并进一步探讨这种影响可能的机制。方法1.将紫杉醇划定为四个浓度级,分别为0.004ug/ml、0.04ug/ml、0.4ug/ml、4ug/ml [ 1 ] ,以这四个浓度分别作用于骨肉瘤OS-732细胞,绘制生长曲线。2.将紫杉醇浓度固定于1.2mg/ml(临床最大使用剂量),分别与2.0、5.0mmol/L的咖啡因联合,作用于骨肉瘤OS-732细胞,绘制生长曲线。结果1.浓度为0.004ug/ml时,紫杉醇对骨肉瘤OS-732细胞株的生长即有明显抑制,与未加药物的空白对照组相比有明显差异,且随着浓度的增大和作用时间的延长,细胞凋亡率更加明显。2.与2.0mmol/L相比,5.0mmol/L咖啡因联合1.2mg/ml紫杉醇对骨肉瘤OS-732细胞的生长抑制更加明显;流式细胞仪检测结果表明,咖啡因与紫杉醇联合作用组,OS-732细胞被阻滞于G0/G1期,细胞周期明显延长,并且随着时间的延长,细胞的凋亡率不断增加。结论1.紫杉醇单药作用,即对骨肉瘤有明显抑制,这种抑制作用随浓度的增大而增大,曲线呈上升态势。2.本实验在体外的结果证明,以咖啡因做为增效剂,协同紫杉醇,可明显抑制骨肉瘤OS-732细胞的增殖并促进其凋亡。其协同机制可能是咖啡因抑制了骨肉瘤细胞某些基因的修复,并逆转了肿瘤细胞对于紫杉醇的耐药性。至于两药联合是否在体内也有相似作用,有待于临床推广及进一步证实。