目的：分泌磷蛋白2(Secreted Phosphorprotein2，SPP2)是最初从牛骨密质中分离纯化的一种非胶原基质蛋白质，由于在其第131到139位氨基酸残基处存在一段富含磷酸化丝氨酸的序列且分子量约为24kDa，因而又被称为分泌磷蛋白24(SPP24)。研究表明，SPP2可抑制半胱氨酸蛋白酶、参与骨形成、存在于血清胎球蛋白矿物质复合物(FMC)中并抑制钙化作用，但其作用机制尚未明确。本研究的目的就是通过基因工程技术，将人SPP2成熟蛋白基因片段克隆到原核表达系统中进行诱导表达，从而获得高纯度的重组蛋白并检测其生物学活性。　　 方法：提取人肝癌组织总RNA，通过RT-PCR方法扩增人SPP2成熟蛋白编码区基因并克隆至原核表达载体pET-22b(+)，将测序正确的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)，IPTG诱导重组蛋白表达，用Ni-NTA柱层析进行纯化，SDS-PAGE及Western-blot检测、鉴定目的蛋白的表达。通过重组蛋白对木瓜蛋白酶的抑制作用检测其生物学活性。在不同时间、温度下对重组蛋白进行热处理，研究其对木瓜蛋白酶抑制作用的影响。　　 结果：重组质粒测序和酶切结果显示SPP2成熟蛋白基因已成功克隆到pET-22b(+)。IPTG诱导重组菌后有25kDa大小的目的蛋白表达。优化诱导表达条件后获得可溶性表达的目的蛋白，纯化后纯度达90％，Western-blot表明其具有His标签抗原活性。重组SPP2成熟蛋白可抑制木瓜蛋白酶的水解作用(酪蛋白为底物)，重量抑制比为1:3.1，抑制比活性为2511U/mg。对重组SPP2进行热处理，随着处理温度的升高和处理时间的延长，重组SPP2对木瓜蛋白酶的抑制活性明显降低。　　 结论：本研究采用基因工程的方法，利用大肠杆菌表达系统，重组表达了具有生物学活性的可溶性人SPP2成熟蛋白。木瓜蛋白酶是典型的半胱氨酸蛋白酶，本研究通过实验检测了重组SPP2对木瓜蛋白酶的抑制作用，表明SPP2具有半胱氨酸蛋白酶抑制剂活性，为进一步研究SPP2的生理功能和作用机制奠定了基础。