【摘 要】
：
目的：研究125I－RC-160(125I-伐普肽)对转染人生长抑素受体二亚型（hSSTR2）基因的肺腺癌A549细胞（A549-hSSTR2）受体内化的规律，探讨131I－RC-160对A549-hSSTR2细胞的杀伤作用及其对A549-hSSTR2移植瘤的抑制作用。方法：①采用放射性配基结合分析法，以125I－RC-160为放射性配基，测定A549-hSSTR2细胞及未转染hSSTR2基因的A
论文部分内容阅读
目的：研究125I－RC-160(125I-伐普肽)对转染人生长抑素受体二亚型（hSSTR2）基因的肺腺癌A549细胞（A549-hSSTR2）受体内化的规律，探讨131I－RC-160对A549-hSSTR2细胞的杀伤作用及其对A549-hSSTR2移植瘤的抑制作用。
方法：
①采用放射性配基结合分析法，以125I－RC-160为放射性配基，测定A549-hSSTR2细胞及未转染hSSTR2基因的A549细胞（pcDNA3质粒转染组，A549-pc3）与125I－RC-160在37℃温育不同时间（0.25、0.5、1、4、8、20、24h）的内化率；
②采用噻唑蓝（MTT）法观测不同浓度131I－RC-160、Na131I、RC-160对A549- hSSTR2细胞及A549-pc3细胞作用24h、48h、72h、96h的杀伤作用；
③建立A549-hSSTR2裸鼠皮下移植瘤模型，同时建立A549-pc3移植瘤模型作对照，观察131I－RC-160、RC-160、Na131I对移植瘤的抑制作用，等量的生理盐水作药物的空白对照，治疗结束后，计算抑瘤率，随后处死裸鼠取肿瘤组织作HE染色和免疫荧光染色观察瘤组织的病理变化。
结果：
①37℃条件下，125I－RC-160迅速与A549-hSSTR2受体结合并使受体发生内化。1h内，A549-hSSTR2细胞结合（内化部分+膜受体结合部分）、受体内化及膜受体结合的放射性计数均随时间的延长而增加，在1h时，A549-hSSTR2细胞结合率（细胞结合的放射性计数与总放射性计数比）为(18.2±1.9)％，其中受体内化率（内化部分放射性计数与总放射性计数比）为(8.4±1.3)％，膜受体结合率（膜受体结合的放射性计数与总放射性计数比）为（9.8±1.2）％。1h后，A549-hSSTR2细胞结合率随时间的延长有略微下降，膜受体内化率随时间的延长继续增加，膜受体结合率随时间的延长逐渐减少，至24h时，A549-hSSTR2细胞结合率为(16.9±2.2)％，受体内化率为(13.0±1.1)％，膜结合率为（3.9±2.2）％。A549-pc3细胞结合的放射性明显低于A549-hSSTR2细胞，在1h时，A549-hSSTR2细胞结合率为(5.7±1.4)％,至24h时，A549-hSSTR2细胞结合率为(5.2±1.3)％。
②131I－RC-160对A549-hSSTR2细胞的杀伤作用较其对A549-pc3细胞杀伤作用明显增强，并呈一定的剂量-效应和时间-效应关系，在96h时，3700KBq/ml 131I－RC-160对A549-hSSTR2细胞的抑制率达（78.8±5.9）％，对A549-pc3细胞的抑制率为(7.8±4.7)％；131I－RC-160对A549-hSSTR2细胞的杀伤作用明显强于RC-160，在96h时，131I－RC-160对A549-hSSTR2细胞的抑制率约为RC-160的3.5倍；Na131I对A549-hSSTR2及A549-pc3两种细胞均无明显杀伤效应。
③A549－hSSTR2移植瘤中，与生理盐水组比较，131I－RC-160治疗组和RC-160治疗组的移植瘤生长明显受抑，其抑瘤率分别为（75.1±4.2）％和（45.2±3.7）％，HE染色显示131I－RC-160组的肿瘤组织大部分片状坏死，坏死区域达80％左右，RC-160组瘤体组织也可见部分点片状坏死，免疫荧光染色显示131I－RC-160治疗组和RC-160治疗组的坏死区域荧光强度明显减弱，未坏死区域与生理盐水对照组均呈现明亮的绿色荧光；A549-pc3移植瘤组中，131I－RC-160和RC-160对瘤体有较弱的抑制效应，但无统计学意义（P>0.1），HE染色显示可见点状坏死，未见明显片状坏死，免疫荧光染色各组均未见明确的绿色荧光。NaI组对转染或未转染SSTR2的移植瘤的作用与生理盐水组比较差异无统计学意义。
结论：
①125I－RC-160可以使转染hSSTR2基因A549细胞膜受体内化；
② RC-160 及131I－RC-160 对A549-hSSTR2细胞及其移植瘤的杀伤作用较其对A549-pc3细胞及其移植瘤的杀伤作用明显增强；131I－RC-160 对A549-hSSTR2细胞及其移植瘤的杀伤作用较RC-160增强。
③转染SSTR2基因介导放射性核素靶向治疗为外源性受体基因介导核素靶向性内照射治疗肿瘤提供依据，为SSTR表达阴性的肿瘤提供一种新的治疗途径。
其他文献
miRNA是一类不进行翻译的非编码RNA分子，长度约为19～24个碱基对（bp），主要与信使RNA（mRNA）的3′UTR结合。miRNA的主要功能是通过靶向mRNA进行降解或翻译抑制来调控基因表达。miRNA的种子序列与靶mRNA的3′UTR形成部分互补或完全互补，借此发挥其特有的基因抑制性作用。目前已经有越来越多的学者开始着手针对miRNA的研究。不同的miRNA可能在许多途径上表现出致癌或肿
本文对儿童特发性血小板减少性紫癜外周血中CD、CD、sFas和sFasL的表达及临床意义进行了研究。文章通过检测CD、CD及sFas、sFasL在儿童急慢性ITP中的表达，研究了其在儿童ITP发病机制中的作用,探索了CITP与AITP的免疫机制。研究表明：儿童ITP的发病过程中存在细胞免疫异常；CD共刺激信号传导通路异常参与儿童ITP的发病；sFas和sFasL凋亡参与儿童ITP的发病过程,且可能
目的：探讨肝硬化门静脉高压症患者脾脏的TGF-β的表达情况和肝硬化门静脉高压症患者行脾脏切除手术前后TGF-β水平的变化。方法：自2006年5月至2007年2月在我院的16例行脾切除手术的门静脉高压症患者，其中肝功能Child-PughA级(Child-PughA组)7例，肝功能Child-PughB级(Child-PughB组)9例，及7例因外伤而行脾切除手术的患者(对照组)作为研究对象，应用双
目的:检测正常子宫内膜和子宫内膜样腺癌组织中细胞周期S期激酶相关蛋白(s-phase kinase associated protein 2)skp2mRNA和p27mRNA表达水平及正常子宫内膜、异常增生子宫内膜和子宫内膜样腺癌组织中skp2蛋白和p27蛋白表达情况及临床意义，探讨它们在子宫内膜样腺癌中发生、发展中的作用。方法:采用RT-PCR法检测37例子宫内膜样腺癌和16例正常子宫内膜组织(
背景：神经病理性疼痛是中枢敏感化和外周敏感化共同作用的结果。目前认为防止中枢敏感化最重要的方法在于减少外周敏感化的形成。研究表明P2X受体在外周敏感化过程中起着重要作用。因此研究抑制P2X受体参与外周敏感化对疼痛机制的研究有着重要的意义。目的：本研究拟采用免疫组织化学方法，观察腹腔注射(i.p.)不同剂量的吗啡对坐骨神经结扎大鼠热痛觉过敏以及背根神经节(DRG)上P2X受体表达的影响。方法：30只
小剂量氯胺酮和吗啡对慢性神经痛大鼠P2X受体表达的影响目的：本研究拟采用免疫组织化学方法，观察连续腹腔注射小剂量氯胺酮和吗啡对慢性神经痛大鼠镇痛效应以及对大鼠脊髓背角、大脑皮质、海马P2X受体表达的影响，探讨P2X受体引起神经病理痛的可能机制。方法：选择雄雌SD大鼠32只，体重160-220g，随机分为4组(n=8)：S组(假手术组)，C组：CCI+生理盐水；K组：CCI+氯胺酮(10mg·kg)
目的：本实验拟采用免疫组织化学方法，观察慢性神经痛大鼠背根神经节P2X受体的表达，腹腔注射维拉帕米和曲马多对慢性神经痛大鼠镇痛效应的观察及背根神经节P2X受体表达的影响。方法：54只纯种清洁级成年SD大鼠，体重150～190g，．随机分为9组：假手术组(S组，n=6)、手术组(n=48)。手术组又随机分为8个亚组：腹腔注射生理盐水组(NS组，n=6)、腹腔注射维拉帕米组(V5组，n=6)、腹腔注射
目的；随访观察脑梗死(CI)复发与血清叶酸(FA)、维生素B(VitB)浓度的关系，同时比较补充FA、VitB治疗对脑梗死复发的影响。方法；对166例急性CI患者于入院次日及住院7天后早晨抽空腹静脉血测血清FA、VitB浓度，取两次测得的平均值，住院7天后记录有无高血压病、糖尿病、高脂血症、冠心病，然后根据血清FA、VitB值将166例患者分为血清FA、VitB正常组和降低组，将血清FA、VitB
目的：缺血性脑水肿是脑卒中的重要并发症之一，也是脑梗塞早期死亡的主要原因，是目前神经病学研究的热点之一。水通道蛋白-4(AQP4)是一种选择性水通透的内在膜蛋白，可以增加细胞膜对水的通透性，在脑组织水的调节中起重要作用。钙离子是生物体内最具生物活性的离子，钙离子浓度的高低对调节细胞的活动起着决定性的作用。本实验通过制备大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型，研究大鼠缺血性脑水肿脑水含量、钙离子浓度和A
目的: 研究血管内皮生长因子165（VEGF165）对早期兔腱骨愈合的影响。方法：20只健康、骨骼成熟的新西兰兔的双后肢的趾长屈肌腱和胫骨建立腱骨愈合模型，随机编号，分为实验组、对照组2组。实验组中，将100ng VEGF165溶入0.5mlPBS（磷酸盐缓冲溶液），然后注入骨隧道中；对照组中，仅将0.5mlPBS注入骨隧道中。在术后2、5周时，分别从实验组和对照组中随机取6个标本进行生物力学检查