苹果渣是苹果加工业的主要副产物,我国每年加工产生的苹果渣约有100多万吨,苹果渣资源的合理利用,是促进苹果加工产业高效发展和减少生态环境污染的重要途径。微生态制剂具有改善动物体内微生态平衡、预防疾病、促进生长及净化养殖环境等作用,研发新型微生态制剂,是实现动物饲养安全、健康、无残留污染的无抗养殖的有效途径。本文以苹果渣为原料,研究了自然发酵苹果渣中的微生物组成,分离筛选了有益乳酸菌、酵母菌株,优化了单菌及混菌制备微生态制剂的发酵工艺,初步确定了微生态制剂的质量指标。主要结果和结论如下：1.苹果渣微生物组成分析及发酵益生菌的筛选从自然发酵苹果渣中分离纯化得到10株菌,通过形态学观察、生理生化测定,结合ITS区、26S rRNA和16S rRNA基因序列分析等多相分类法对菌株进行了鉴定。初步确定为：黑曲霉(Aspergillus niger),白地霉(Galactomyces geotrichum),马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus),烟曲霉(Aspergillus fumigatus),乳酸乳球菌(Lactococus lactis),青霉(Penicillium paneum),假丝酵母(Candida tartarivorans),植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)和东方伊萨酵母(Issatchenkia orientalis);其主要微生物组成为酵母菌和乳酸菌。对5株供试菌进行单因素试验,以发酵后菌落总数为指标,确定干酪乳杆菌和马克斯克鲁维酵母为发酵菌株。2.单菌固态发酵工艺条件的优化通过单因素试验,研究了不同氮源对干酪乳杆菌固态发酵的影响,确定了发酵培养基配方为：苹果渣50g/500mL,尿素3%,磷酸氢二钾0.2%,水料比1.2：1；优化得到干酪乳杆菌苹果渣发酵条件为：接种量7.5%,发酵温度33℃,发酵时间79h,在此条件下进行固态发酵,菌落总数达到6.235×109CFU/g。通过单因素试验,考察了不同氮源对克鲁维酵母固态发酵的影响,确定了发酵培养基配方为：苹果渣40g/500mL,尿素2%,磷酸氢二钾0.3%,水料比1.0：1；优化得到的克鲁维酵母苹果渣发酵条件为：接种量6.6%,发酵温度28℃,发酵时间73h,在此条件下进行固态发酵,菌落总数达到2.862×109CFU/g。3.混菌固态发酵工艺条件的优化通过单因素试验,研究了不同氮源对苹果渣混菌发酵的影响,并确定了苹果渣发酵培养基配方为：苹果渣39g/500mL,尿素3%,磷酸氢二钾0.3%,水料比1.2：1。通过单因素和响应面优化试验,确定了苹果渣混菌发酵条件为：接种量9%,接种比1：2(乳酸菌：酵母菌),发酵温度30℃,发酵时间92h,在此条件下进行固态发酵,菌落总数达到8.347x109CFU/g。4.菌剂制备及质量稳定性分析采用优化的发酵条件发酵苹果渣,试制菌剂,进行复合酶活和多糖等指标测定。研究显示,干酪乳杆菌发酵的酶活结果为纤维素酶18.05u/g,木聚糖酶35.47u/g,果胶酶56.19u/g；多糖含量为5.90%。克鲁维酵母发酵的酶活结果为纤维素酶30.74u/g,木聚糖酶58.30u/g,果胶酶72.35u/g；多糖含量为7.30%。混菌发酵的酶活结果为纤维素酶49.21u/g,木聚糖酶95.13u/g,果胶酶126.30u/g；多糖含量为10.80%；经稳定性试验,菌量均保持在108CFU,g。