论文部分内容阅读
目的探讨肿瘤射频消融原位裂解物致敏树突状细胞(DC)的瘤苗联合细胞因子诱导杀伤活性细胞(CIK)的抗肿瘤活性。方法制备BALB/C小鼠骨髓来源的DC及脾脏来源的CIK细胞，建立射频消融灭活BALB/C小鼠皮下结肠癌移植瘤的实验模型，将其原位裂解的肿瘤组织反复冻融后取上清，采用lowry蛋白定量法定量，以终浓度5μg/ml负载培养第5d的DC(即Ag-DC)，2d后再与培养第7d的CIK细胞共培养48h。应用流式细胞术分析其表面共刺激分子的表达，使用CCK-8法检测其体外杀伤活性。建立4组肿瘤治疗与预防模型分别是Ag-DC-CIK组，DC-CIK组，CIK组与PBS对照组，采用ANOVA方差分析比较各组间种植瘤体积的变化趋势，Log-rank检验比较各组小鼠的生存时间。结果Ag-DC表面表达CD80、CD86、MHC-II、CD11c分别为86.3%、29.4%、75.4%、82.5%；未处理的DC表面表达CD80、CD86、MHC-II、CD11c分别为68.6%、15.1%、64.5%、66.7%；小鼠肿瘤预防模型提示各组7天成瘤率分别为：Ag-DC-CIK组60%(3/5)、DC-CIK组80%(4/5)、CIK组80%(4/5)、PBS对照组100%(5/5)；且Ag-DC-CIK组小鼠的肿瘤体积生长缓慢，与DC-CIK组、CIK组、DC组和PBS对照组的小鼠相比，差异有统计学意义(F1=165.48，F2=151.54，P＜0.00)。治疗模型提示：Ag-DC-CIK组小鼠的平均生存期(44±3)d，DC-CIK组小鼠的平均生存期(34±10)d，CIK组小鼠的平均生存期(26±4)d，PBS对照组小鼠的平均生存期(22±3)d，差异有统计学意义(P=0.01)；且Ag-DC-CIK组小鼠的肿瘤体积生长缓慢，与DC-CIK组、CIK组和PBS对照组的免疫小鼠相比，差异有统计学意义(F1=69.90，F2=33.71，P﹤0.00)。结论负载肿瘤射频消融原位裂解产物的DC细胞联合CIK细胞可以提高细胞抗肿瘤活性，为肿瘤细胞免疫治疗提供新策略。