云南产阳春砂仁与进口砂仁化学成分及主要药效学的比较研究

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目的:以目前市场销售砂仁的主流品种云南产阳春砂仁(YCS)和进口砂仁(JKS)作为研究对象,通过对药材的化学成分研究、主要药效学比较(整体动物及离体胃肠肌对胃肠动力、消化液分泌的影响、以及镇痛等实验)以了解两种砂仁的成分、主要药效差异,对市场销量最大的两种砂仁的品质优劣作进一步的比较研究,以期对YCS的临床应用及深入开发提供实验依据。方法:1.采用GC—MS联用技术、LC-Q-TOF-MS/MS系统、HPLC法、福林酚法、紫外-可见分光光度法,对YCS与JKS的化学成分进行分析检测,以了解两种砂仁的化学成分差异。2.采用幽门结扎法收集大鼠胃液并分析,同时取血清研究两种砂仁对大鼠胃液及胃动素(Motilin,MTL)、P物质(Substance P,SP)、血管活性肠肽(Vasoactive intestinal peptide,VIP)等胃肠激素的影响;并用葡聚糖蓝显色及离体胃肠平滑肌实验研究两种砂仁对胃肠动力作用的影响;用番泻叶致泻及冰醋酸致痛实验以观察两种砂仁对小鼠止泻及镇痛的作用。结果:1.YCS与JKS的化学成分具有明显区别。YCS含挥发油约3.75%,共检测出41种化学成分,挥发油中含量最高者为乙酸龙脑酯(73.61%),占其干燥品的2.76%,其次为樟脑(17.27%);JKS含挥发油约为1.97%,共检测出50种化学成分,挥发油中含量最高者为樟脑(56.77%),其次为乙酸龙脑酯(23.17%),乙酸龙脑酯占其干燥品的0.46%,两药挥发油中除乙酸龙脑酯、樟脑、龙脑、D-柠檬烯、异蒲勒醇、β-松油烯、莰烯、β-侧柏烯、β-月桂烯、α-水芹烯、1-甲基-1,4-环己二烯为共有成分外,其余成分均为各自所特有;YCS中香草酸、总酚性成分、总黄酮、YNS中Quercetin-8-O-α-L-[rhamnopyranosyl]-3-O-α-Lrhamnopyranosyl-(1’-2’’)-β-D-glucopyranoside(用M754表示)等非挥发性成分含量高于JKS。JKS中槲皮苷、Methyl-6-(6-(3,4-dimethoxy)-benzalacryl-β-Dglucosyl)-O-β-D-glucopyranoside(用M546表示)、原儿茶酸含量高于YCS。2.YCS与JKS挥发油高剂量组能显著抑制幽门结扎大鼠的胃液分泌,降低胃酸酸度,增加胃蛋白酶活力,提高MTL与SP的含量,降低VIP的表达,且非挥发性成分作用弱于挥发油,YCS作用优于JKS;此外,JKS非挥发性成分无降低VIP含量的作用,且其低剂量组可抑制胃蛋白酶活力。3.在胃肠动力实验研究中,两种砂仁挥发油均能显著增加胃残留率,YCS非挥发性成分对此也有显著作用,而JKS非挥发性成分对此无影响。两药的挥发油均能明显促进肠推进,YCS作用略优于JKS,非挥发性成分对肠推进影响不显著。对SD大鼠的离体肠、胃平滑肌实验结果表明:(1)随着剂量逐渐增加,YCS对正常肠肌呈先兴奋后抑制作用,JKS呈抑制-兴奋-抑制作用;对于胃平滑肌,YCS及JKS的非挥发性成分呈先兴奋后抑制作用,JKS挥发油呈抑制-兴奋-抑制-作用(2)两药对阿托品所致肠、胃平滑肌的松弛有显著对抗作用,且YCS作用略优于JKS。(3)两药非挥发性成分对乙酰胆碱所致肠肌痉挛有明显抑制作用,挥发油有明显抑制乙酰胆碱所致胃平滑肌痉挛作用,YCS作用略优于JKS;(4)两药挥发油对氯化钡所致肠肌痉挛有明显松弛作用,YCS作用略优于JKS,而非挥发性成分无此作用;YCS非挥发性成分、JKS挥发油对氯化钡所致胃平滑肌痉挛有明显松弛作用,JKS作用略优于YCS。4.两药可减少番泻叶所致腹泻小鼠的稀便点数,YCS作用明显优于JKS,且可延长小鼠排稀便潜伏期,JKS则无此作用。两药均能极显著减少冰醋酸所致小鼠疼痛的扭体次数,两药此作用差异不显著;YCS、JKS挥发油均有一定延长扭体潜伏期作用,但JKS非挥发性成分无此作用。结论:1.化学成分检测显示,两药化学成分组成及含量有较大差异,YCS挥发油及乙酸龙脑酯含量远高于JKS,且JKS中乙酸龙脑酯含量达不到药典要求。挥发油中主要成分YCS为乙酸龙脑酯、樟脑、莰烯、龙脑、D-柠檬烯,JKS为樟脑、乙酸龙脑酯、D-柠檬烯、龙脑、莰烯、β-月桂烯、α-杜松醇。2.YCS与JKS均可减少胃液量及降低胃酸酸度,提高胃蛋白酶活力,而改善幽门结扎大鼠的的胃黏膜损伤;可提高兴奋性胃肠激素MTL、SP的浓度,降低抑制性胃肠激素VIP浓度,显示出良好的促胃肠动力作用,另可抑制胃排空、促进肠推进,对离体肠、胃平滑肌的作用与给药浓度与平滑肌机能状态有关,两药对胃肠动力显示出显著的双向调节作用;另两药对胃肠道表现出显著的止泻、镇痛作用。以上实验中挥发油效应总体强于非挥发性成分。JKS在胃肠道功能调节及疾病治疗中显示出与YCS相似的作用,但YCS药理作用明显优于JKS。基于YCS与JKS在化学成分及含量的显著差异,以及YCS在药理作用中的明显优势,建议在砂仁购买使用中,对两种砂仁的差异给予充分的考虑,以便获得安全有效的砂仁药材,同时,应大力推广种植YCS,以使药品、食品领域能获得合格的砂仁产品。
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