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[目的]对广西匙羹藤Gymnemasylvestre(Retz.)Schult的植物形态及其茎、叶进行生药学研究;并对其茎的95%乙醇提取物降血糖药理作用及机理进行实验研究,为进一步的应用提供科学依据。
[方法]采用生药学的鉴别手段来观察药材性状、显微特征及理化鉴别特征;通过生化检测、组织化学、免疫组织化学等研究方法,观察匙羹藤茎95%乙醇提取物(Gymnemasylvestre95%Ethano1icExtracts,简称GSEE,下同)对正常小鼠、四氧嘧啶性糖尿病小鼠、肾上腺素性糖尿病小鼠、正常小鼠的糖耐量和四氧嘧啶性糖尿病大鼠的降糖作用,给药10d后,观察小鼠和大鼠的体重变化,并利用生化检测方法测定空腹血糖、血清胰岛素、血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)含量;测定肝糖原含量;取胰腺做HE染色和免疫组织化学染色,显示胰岛β细胞,并计算胸腺和胰腺的重量指数,探讨其降糖机制
。[结果](1)显微鉴别:茎横切面:皮层、韧皮部、髓射线及髓的细胞中均含有草酸钙簇晶;皮层、韧皮部及髓的细胞间隙分布有乳汁管;中柱鞘纤维束中纤维与石细胞共存。茎的粉末,草酸钙簇晶散在或存在于细胞中排列成行。叶横切面,仅中柱上下表皮有非腺毛,细胞间隙分布有乳汁管。叶粉末有两种非腺毛,草酸钙簇晶棱角较尖。以上特征有鉴别意义。
(2)理化鉴别:化学定性反应分析结果显示,匙羹藤茎、叶都具有三萜皂苷的化学反应特征,在茎、叶冷浸液与回流提取液的光谱扫描图与TLC鉴别均表明,茎、叶的95%乙醇、50%乙醇、石油醚(60~90℃)、氯仿、水提取物的吸收峰与斑点相似,提示两者主要成分有可能相同。
(3)降血糖药理作用研究:①GSEE各剂量组能显著降低四氧嘧啶性糖尿病小鼠血糖值;升高血清胰岛素的浓度,与糖尿病模型组比较,差别有显著性意义(p<O.05-O.01)。②GSEE对正常小鼠的血糖在较高剂量时有一定的影响(p<O.05)。③GSEE对肾上腺素性糖尿病小鼠有降血糖的作用(p<0.01)。④GSEE能够增强正常小鼠的葡萄糖耐受能力,耐受时间在1h左右。⑤四氧嘧啶性糖尿病大鼠给药1Od后,GSEE(高、中剂量组)血糖值明显低于模型组,且差异有显著性意义(p高<O.01,p中<0.05);血清胰岛素也明显高于模型对照组(p高<O.01,p中<0.05);GSEE还能升高SOD活性、降低MDA含量(p<0.05~O.01),提高肝糖原含量,明显升高胸腺和胰腺的重量指数,与模型组比较,差别有显著性意义(p<0.05-O.01),抵抗四氧嘧啶引起的胸腺、胰腺萎缩。大鼠胰腺的HE染色和免疫组织化学染色可见,GSEE各剂量组胰岛β细胞形态、结构与模型对照组比较,有不同程度的改善,但低剂量组仍有少数细胞肿胀及变性,胰岛β细胞数均明显多于模型组(p高,中<O.05)。GSEE对四氧嘧啶性糖尿病大鼠体重和TC、TG无明显影响(p>O.05)。⑥急性毒性测定显示,GSEE灌胃的最大耐受量(MTD)为48Og/kg,相当于临床拟用剂量的578.31倍。
[结论]对广西匙羹藤进行较系统的生药学研究,其性状、显微及理化特征可作为鉴别真伪的参考依据;在药理实验方面,GSEE对四氧嘧啶性糖尿病小鼠和大鼠具有显著的降血糖作用,其降糖机制可能与GSEE促进四氧嘧啶所致糖尿病大鼠胰岛β细胞损伤的修复,促进胰岛素分泌和降低胰岛素分解速度,促进肝组织糖原合成等类胰岛素样作用和清除自由基及抗脂质过氧化过程有关。