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[目的]骨肉瘤是骨科常见的恶性肿瘤之一,患者多为青少年并且预后较差,如何改善患者的预后转归是一大难题。手术切除作为主要的治疗手段,手术中的每个环节都会对骨肉瘤的治疗产生不同的影响。七氟烷具有良好镇痛、可控性好、病人易耐受等优点广泛用于全身麻醉。越来越多的证据表明七氟烷对于不同的肿瘤细胞表现出不同的影响作用。肿瘤细胞增殖、侵袭是肿瘤转移的关键环节。了解七氟烷对肿瘤细胞增殖、侵袭的影响是很有必要的。七氟烷对肿瘤的影响是当今研究的热点,已经有许多文献报道了七氟烷麻醉对一些肿瘤如肺癌、乳腺癌的影响。研究发现,基因P53、MMP2在肿瘤的发生和转移过程中发挥着重要的角色,TGFβ基因对于骨肉瘤的形成也是有影响的。然而,七氟烷对骨肉瘤的影响却鲜有报道。随着骨肉瘤患者进行七氟烷全身麻醉的比例增加,研究七氟烷对骨肉瘤细胞的影响就显得更加有意义。本文旨在通过MTT细胞增殖实验、流式细胞仪检测实验、细胞划痕实验及Transwell侵袭实验研究不同浓度七氟烷(1.7%七氟烷、3.4%七氟烷、5.1%七氟烷)处理相同时间对骨肉瘤Saos2细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的影响,通过RT-PCR实验及蛋白印迹实验研究不同浓度七氟烷处理相同时间对P53、MMP2、TGF β基因在Saos2细胞中的表达情况的影响,希望能通过本研究能够使七氟烷更加合理、科学地运用于骨肉瘤患者手术中。[方法]购买Saos2细胞,进行培养、传代、冻存、复苏,根据实验要求接种到不同的细胞培养板或瓶进行培养。取对数期生长的Saos2细胞接种到96孔板,用不同浓度七氟烷处理贴壁生长的Saos2细胞各2h,分为1.7%七氟烷组(s1)、3.4%七氟烷组(s2)、5.1%七氟烷组(s3)、对照组(c)。对各组进行MTT细胞增殖实验,运用SPSS软件分析计算各组的抑制率。取对数期生长的Saos2细胞接种到六孔板,不同浓度七氟烷处理之后加入荧光染料,用流式细胞仪检测各组Saos2细胞的凋亡率,观察七氟烷对Saos2细胞凋亡能力的影响;取对数期生长的Saos2细胞接种到六孔板,进行不同浓度七氟烷处理,通过细胞划痕实验了解各组的迁移情况,研究七氟烷对Saos2细胞迁移能力的影响;取对数期生长的Saos2细胞接种到24孔板,不同浓度七氟烷处理后,通过Transwell侵袭实验了解各组的侵袭情况,研究七氟烷对Saos2细胞侵袭能力的影响;取对数期生长的Saos2细胞接种到细胞培养小瓶,进行不同浓度七氟烷处理,通过蛋白质印迹和RT-PCR实验检测P53、MMP2、TGFβ在Saos2细胞中的蛋白及基因表达情况,观察七氟烷对P53、MMP2及TGF β的影响。[结果]对照组与七氟烷不同浓度组相比较,低浓度(≤1.7%)七氟烷抑制Saos2细胞增殖,高浓度(≥3.4%)七氟烷则表现出促进Saos2细胞增殖的作用,差异具有统计学意义(P<0.05);七氟烷组Saos2凋亡细胞所占的比例比对照组增加,七氟烷可能促进Saos2细胞凋亡;七氟烷组与对照组比较,细胞迁移能力显著降低;Transwell侵袭实验中,对照组与实验组比较,Saos2细胞侵袭能力降低。通过RT-PCR实验,在琼脂糖凝胶电泳检测分析中没有检测到P53基因的目的条带,MMP2基因的目的条带在图像上被清晰检测到。通过蛋白印迹实验,基因P53在图像曝光中没有发现目的条带;在MMP2基因的蛋白印迹图像中,七氟烷处理组的目的条带与对照组比较增大;在TGF-β基因的蛋白印迹图像中,七氟烷处理后目的基因的条带增大。[结论]七氟烷对Saos2骨肉瘤细胞的增殖、迁移、凋亡能力具有促进或抑制的作用,且与浓度相关。低浓度(≤1.7%)七氟烷抑制Saos2细胞增殖,高浓度(≥3.4%)七氟烷则表现出促进Saos2细胞增殖;七氟烷促进Saos2细胞凋亡,抑制Saos2细胞迁移,促进Saos2细胞侵袭能力。在Saos2细胞中,没有P53基因的表达。七氟烷促进TGF-β基因在Saos2中的蛋白表达,抑制MMP2基因的蛋白表达。