论文部分内容阅读
目的:探讨核心蛋白多糖(Decorin)对兔晶状体上皮细胞(lens epithelial cells, LEC)增殖的抑制作用及其剂量一效应与时间一效应的关系,为药物防治后发性白内障提供新的选择。 方法:MTT比色法分别测定不同浓度的Decorin(0.1mg·L-1,1mg·L-1,10mg·L-1)作用于LEC不同时间后的细胞生长抑制率;采用流式细胞技术测定细胞周期,用ELISA法检测各组培养液上清中TGF-β的水平,RT-PCR测定TGF-βmRNA的表达,免疫细胞化学观察α-平滑肌肌动蛋白(α-Smooth muscle actin,α-SMA)。 结果:MTT比色法实验结果显示,24h对照组抑制率为(3.62±1.34)%,0.1mg·L-1,1mg·L-1和10mg·mL-1,Decorin组抑制率分别为(4.14±2.08)%,(12.93±2.47)%,(23.47±1.78)%,LEC生长抑制率增加(P<0.05),随着Decorin作用时间延长,生长抑制率增加(P<0.05),流式细胞技术示,随药物浓度及作用时间延长,LEC出现明显的G0/G1期阻滞,G0/G1期细胞所占比例明显升高(P<0.05),ELISA示,对照组TGF-β水平为427.24±41.34 ng/细胞,0.1 mg·L-1,1 mg·L-1和10mg·mL-1,Decorin组TGF-β水平分别为236.01±28.63 ng·细胞-1,117.86±18.14 ng·细胞-1,111.72±26.72 ng·细胞-1,与对照组有明显的差别(P<0.05),RT-PCR示Decorin组TGF-βmRNA表达明显减少,与MTT法检测结果呈现大致相同的趋势,免疫细胞化学观察,对照组α-SMA表达较多,细胞肥大,细胞质呈棕色,Decorin组α-SMA较少表达。Decorin表现出明显的抑制作用。 结论:Decorin对LEC有抑制增生和诱导凋亡作用,且呈明显的剂量-效应与时间-效应关系,可望成为后发性白内障的防治药物。