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目的:1.采用代谢组学研究技术对四氯化碳(CC14)诱导的肝纤维化大鼠肝脏组织进行超高液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)分析,通过对比模型组与给药组之间代谢物水平的变化,对潜在生物标志物进行分析,从而揭示岩黄连对CC14诱导肝纤维化大鼠的干预作用。2.采用网络药理学的研究方法,构建岩黄连-化学成分-靶点-疾病-代谢通路网络图,探究岩黄连干预CC14诱导肝纤维化大鼠的潜在作用靶点,进一步阐释岩黄连干预CC14诱导肝纤维化大鼠的作用机制。3.运用分子对接技术探讨岩黄连化学成分分别对代谢组学和网络药理学整合靶点的相互作用。寻找岩黄连中抗CC14诱导肝纤维化大鼠的潜在活性成分。方法:1.建立CCl4诱导的肝纤维化大鼠模型,将SPF级雄性SD大鼠32只,随机分为空白对照组、模型组、岩黄连组和阳性药对照组,每组8只。动物适应新环境一周后,模型组、岩黄连组和阳性药组分别灌胃给予50%CC14橄榄油溶液0.1 mL/100 g,空白组灌胃给予等体积橄榄油,每周2次,连续10周。造模第七周后开始,岩黄连组给予岩黄连水提物(2.5 g/kg)和阳性药对照组给予秋水仙碱(0.1 mg/kg),给药体积0.5 mL/100 g,空白组和模型组给予等量蒸馏水,每天1次,连续给药4周。2.采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱的代谢组学分析技术,结合多元统计分析,寻找模型组与空白组肝脏差异代谢物质,旨在发现与肝纤维化相关的潜在生物标志物;进一步研究岩黄连所调控的代谢物及代谢通路,阐述岩黄连抗肝纤维化的作用机制。3.对岩黄连的化学成分进行检索,根据化学成分预测其可能作用的靶点。4.通过数据库查询肝纤维化疾病的相关靶点。5.通过数据库查询岩黄连调节代谢通路的相关靶点。6.使用网络可视化软件Cytoscape 3.2.1软件建立岩黄连-化学成分-靶点-疾病-代谢通路的关系网络,找到二者或三者相互关联的靶点。7.对代谢组学和网络药理学的研究结果进行整合,讨论岩黄连对肝纤维化的干预机制。8.使用Sybyl 2.0分子对接软件和SystemsDock在线分子对接网站探讨岩黄连抗肝纤维化的潜在活性成分。结果:1.CC14诱导肝纤维化大鼠肝脏组织中发现6个潜在的生物标志物,其中氧化型谷胱甘肽,N-丙烯酰甘氨酸的水平升高,磷酸胆碱,尿酸,核黄素和泛酸的水平降低。推测其主要扰动了泛酸与CoA生物合成,谷胱甘肽代谢,甘油磷脂代谢和嘌呤代谢。2.岩黄连对CC14诱导的肝纤维化大鼠肝脏中磷酸胆碱,氧化型谷胱甘肽,和N-丙烯酰甘氨酸有下调作用,对尿酸,核黄素和泛酸有上调作用。主要通过回调泛酸与CoA生物合成,谷胱甘肽代谢和嘌呤代谢发挥作用。3.经过网络药理学研究,岩黄连共统计化学成分45个,与肝纤维化相关的疾病基因264个。运用Cytoscape 3.2.1软件构建岩黄连-化学成分-靶点-疾病-代谢通路网络,共发现8个共有相关基因靶点。4.分子对接结果表明,白屈菜红碱,血根碱,卡维丁,脱氢卡维丁和阿魏酰胺可能是岩黄连抗肝纤维化的潜在活性成分。结论:1.CC14诱导肝纤维化大鼠的肝脏代谢轮廓发生显著变化,导致泛酸与CoA生物合成,谷胱甘肽代谢,甘油磷脂代谢和嘌呤代谢絮乱,其中,岩黄连对泛酸与CoA生物合成,谷胱甘肽代谢和嘌呤代谢具有回调作用。2.代谢组学和网络药理学研究发现岩黄连可能通过干预肝纤维化大鼠中的 ALT,FXR,COX-2,MMP-1,AGT,GGT1,FHIT 和 GPD1 靶点起到抗肝纤维化作用。岩黄连化学成分中白屈菜红碱,血根碱,桦木酸,β-香树脂醇乙酸酯和深山黄堇碱可能通过调节ALT,FXR,COX-2和MMP-1靶点起到抗肝纤维化作用。3.分子对接结果表明岩黄连中的白屈菜红碱,血根碱,卡维丁,脱氢卡维丁和阿魏酰胺可能是其抗肝纤维化的潜在活性成分。