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本文确立了用化学滴定分析发酵液中甘油含量的方法,并与酶法、分光光度法进行了比较。结果表明,此法具有测定成本低、重复性好、准确度高、便于操作等特点,是一个分析发酵液中甘油含量的较好方法。 本文通过间歇发酵对文献报道生产1,3-丙二醇的克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)发酵培养基进行了优化,实验所用甘油初始浓度分别为2%、4%和6%。优化后的培养基减少了组分个数,适合于工业应用,并且与文献相比具有较好的1,3-丙二醇转化率。在培养基优化的过程中,还考察了Na+、K+、NH4+等一价阳离子对发酵过程中1,3-丙二醇转化率的影响,结果表明含有较多Na+的培养基甘油的转化率较低,以NH4+为主的培养基甘油的转化率较高。 本文还对克雷伯氏菌在厌氧、微氧、好氧三种情况的间歇发酵生产1,3-丙二醇的转化率及产物生成情况进行了考察,选择甘油初始浓度分别为2%、4%和6%。结果表明,在微氧和好氧的状态下,间歇耗氧发酵的细胞能够正常生长,并产生1,3-丙二醇、乙酸、乙醇等代谢物。这说明细胞在沿耗氧的G3P(3-磷酸甘油)途径代谢过程中,还原途径的负责1,3-丙二醇转化的酶没有受到抑制。在微氧和好氧条件下,产酸量明显比厌氧多,而乙醇量较少,1,3-丙二醇的转化率在初始甘油浓度较低时(2%或4%),以微氧转化效果最佳。本文又通过连续有氧发酵,进一步证实实验用克雷伯氏菌在较长时间(100hr)的有氧状态下,细菌仍然能稳定将甘油转化为1,3-丙二醇,发酵过程负责转化1,3-丙二醇的酶系没有因为氧的存在而受到抑制。