顶孢霉菌株(Acremonium hansfordii)可湿性粉剂制剂加工及药效评价研究

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顶孢霉(Acremonium hansfordii)Ahy1菌株是甘肃农业大学农药系从甘肃省榆中县黄家庄自然感病的桃蚜(Myzus persicae)幼虫分离获得的,该菌对菜蚜有较强的侵染毒力,经安徽农业大学李增智教授鉴定为顶孢霉菌(Acremonium hansfordii)。为使这一虫生真菌资源能尽快应用于农业生产,开发适宜于甘肃干旱条件下生产和应用的虫生真菌微生物杀虫剂,本文对顶孢霉Ahy1菌株加工工艺进行了初步研究,获得了顶孢霉分生孢子可湿性粉剂和分生孢子乳悬剂。主要结果如下。1.通过对顶孢霉Ahy1菌株孢子粉加工工艺的初步研究,选择出一级固体培养的最适培养基为玉米粉麦麸培养基,第六天为最佳培养时间;二级液体培养选择马铃薯-糖培养液振荡培养三天,最适培养条件为25±1℃,120r/min;通过13种固体培养介质培养顶孢霉菌的含孢量和活孢率检测,筛选出了三级产孢培养介质为低值陈米,初步获得孢子粉,孢子含量为5.8×1010个/g,含水量6%,活孢率93.5%,为进一步制剂加工提供依据。2.通过平板培养法,测定菌落形成单位数(cfu值),进行了可湿性粉剂常用助剂对虫生真菌顶孢霉Ahy1菌株孢子的生物学相容性研究。结果表明:载体滑石粉、硅藻土、碳酸钙、膨润土对顶孢霉孢子活力影响不明显;润湿剂中以十二烷基硫酸钠对顶孢霉孢子润湿作用最好,但在高浓度时对孢子萌发和菌丝生长影响较大;分散剂木质素磺酸钠对顶孢霉孢子活力没有影响;紫外保护剂荧光素钠和腐植酸对孢子活力无显著影响;常用稳定剂羧甲基纤维素钠对孢子活力无影响。顶孢霉孢子可湿性粉剂的含孢量达5.8×108个/g、含水量1.729%、悬浮率达82.24%、细度93.62%过220目筛、湿润时间136.01s。顶孢霉孢子可湿性粉剂不同温度下储存稳定性检验结果表明,低温下贮藏对制剂影响不大,但高温下对制剂的稳定性有很大影响,主要是对孢子萌有影响。3.在常温下将孢子粉分别在不同类型溶剂油和乳化剂中贮存,通过定期检测活孢率发现,溶剂油D、E、F对孢子活性影响较小,可作为孢子乳悬剂的溶剂载体;乳化剂I对孢子悬浮乳化的效果最好而活孢率影响最小,容积比为0.3%。其它生物学相容的助剂包括作为悬浮稳定剂的甲基纤维素钠,用量为0.3% (w/v);腐殖酸作为孢子的紫外保护剂,用量为0.1%等。根据筛选出的适宜助剂,加工出顶孢霉菌株乳悬剂,其含孢量为8.5×108个/mL,该制剂在水中有很好的分散性。4.通过对顶孢霉分生孢子可湿性粉剂和分生孢子乳悬剂对蚜虫室内生物测定结果,两种顶孢霉制剂对蚜虫的校正死亡率在24h时较小,而作用后72h表现出明显的杀虫作用;特别是顶孢霉孢子乳悬剂的杀蚜效果较好,其校正死亡率分别为82%、77.7%、60.08%和46.03%;而对照药剂阿维菌素对蚜虫的影响在处理24h后就很明显,分别为97.6%、81.91%、73.27%和65.93%,试验表明其对蚜虫有很高的致死作用。
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