基于蛋白组学技术研究益气温经法代表方强骨饮对原发Ⅰ型骨质疏松症的影响

来源 :浙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dingchao0907
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目的:应用WCX磁珠联合MALDI-TOF-MS方法检测去卵巢骨质疏松大鼠与正常大鼠血清蛋白指纹图谱,筛选差异表达蛋白。验证强骨饮对骨质疏松模鼠相关蛋白的影响,拟寻找筛查、诊断原发I型骨质疏松症的特异分子标志物。方法:1.选择220-250gSD大鼠40只,随机选出10只作为对照组,对照处理;剩余30只中随机抽取10只作实验组,切除双侧卵巢。静养10周,检测骨密度值判断骨质疏松造模成功。空腹下取血lml,采用WCX磁珠制备血清蛋白,分离提纯点靶后,进行MALDI-TOF-MS数据采集,对各组血清蛋白指纹图谱进行均一化处理和数据分析,通过遗传算法结合支持向量机运算,筛选差异蛋白峰,并将选取的差异显著的蛋白峰随机组合,将支持向量机模型预测的具有最高约登指数的蛋白峰组合用以建立诊断模型,其蛋白峰作为疾病候选标志物。2.切卵巢后意外死亡4只,将剩余切除卵巢骨质疏松造模成功的26只SD大鼠分为两组,一组给予喂养强骨饮,为实验组;一组给予生理盐水灌胃,为对照组;于6周、2月取空腹眼底静脉血,ELISA法检测骨质疏松模鼠血清中OrphaninFQ孤啡肽和SelenoproteinW硒蛋白w含量,统计学软件spass19.0分析,以平均数和标准差的形式表示。结果:实验一,4个蛋白峰值有显著差异性,约登指数最高的Orphanin FQ孤啡肽和SelenoproteinW硒蛋白W,初步作为诊断和筛查骨质疏松的标志物;实验二饲养前,Orphanin FQ孤啡肽和SelenoproteinW硒蛋白W均无显著差异,P>0.05;6周后实验组OrphaninFQ孤啡肽值低于对照组,统计学spss19.0软件分析无显著差异,P>0.05;实验组SelenoproteinW硒蛋白w值高于对照组,统计分析有明显差异,P<0.05,有实际意义;2月后实验组OrphaninFQ孤啡肽值低于对照组,实验组SelenoproteinW硒蛋白w值高于对照组,均存在显著差异,P<0.05,均有实际意义。结论:Orphanin FQ孤啡肽和SelenoproteinW硒蛋白W可能作为诊断和筛查原发I型骨质疏松的标志物;Orphanin FQ孤啡肽和SelenoproteinW硒蛋白W与强骨饮治疗原发I型骨质疏松症的机制可能存在关联。
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